配偶子形成初期過程の機構解析

2015 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 25251034
• 研究機関: 基礎生物学研究所
• 研究代表者: 田中 実 基礎生物学研究所, 生殖遺伝学研究室, 准教授 (80202175)
• 研究分担者: 酒井 則良 国立遺伝学研究所, 小型魚類開発室, 准教授 (50202081)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• キーワード: 生殖細胞 / メダカ / ゼブラフィッシュ / 減数分裂 / 性決定 / シスト分裂 / 培養系

研究実績の概要

生殖細胞の性決定遺伝子foxl3の標的遺伝子の同定を進めた。そのためにfoxl3蛋白質を大腸菌で発現させ、モノクローナル抗体の作製を行った。 またfoxl3発現培養細胞を樹立した。さらにfoxl3変異体と野生型の生殖細胞からRNAを単離し、遺伝子発現プロファイル作製のためのライブラリーを調整した。
減数分裂コミットに関与する moto 蛋白質は、生殖顆粒の構成因子 vasa と局在することが明らかとなった。また Moto 変異体では RNA processing に関わる因子の局在が核内へ変化することも見出されたため、これらの局在の場が配偶子初期形成の機構が働く機能の場であり、そこではRNA processing が関与していることが示唆された。
またメダカの卵巣の培養を行い、卵巣内の卵原細胞が維持できる培養系が確立され、ゼブラフィッシュでは精子形成の全過程が培養系で再現できるにいたった。さらに、精巣を皮下に移植することにより、皮下で精子形成を行わせることに成功した。これらの結果により、致死性変異体やイメージングを用いた配偶子形成初期過程の解析が可能となった。

現在までの達成度 (段落)

27年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

27年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [国際共同研究] Universaity of Heidelburg(Germany)
  • 国名: ドイツ
  • 外国機関名: Universaity of Heidelburg
• [国際共同研究] Curie Insitut(France)
  • 国名: フランス
  • 外国機関名: Curie Insitut
• [国際共同研究] Academina Sinica(Taiwan)
  • 国名: その他の国・地域
  • 外国機関名: Academina Sinica
• [雑誌論文] A structurally and functionally common unit in testes and ovaries of medaka (Oryzias latipes), a teleost fish. (2016)
  • 著者名/発表者名: Nishimura, T. Nakamura, S. and Tanaka, M.
  • 雑誌名: Sexual Development 巻: 印刷中 ページ: 印刷中
  • DOI: Doi:10.1159
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] The mechanism of germline sex determination in vertebrates (2016)
  • 著者名/発表者名: Nishimura, T. and Tanaka, M.
  • 雑誌名: Biology of Reproduction 巻: 印刷中 ページ: 印刷中
  • DOI: doi:10.1095/biolreprod.115.138271
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Differentiation of spermatogonial stem cells to functional sperm in culture. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kawasaki, T., Siegfried, K. R., Sakai, N.
  • 雑誌名: Development 巻: 143 ページ: 566-574
  • DOI: Doi: 10.1242/dev.129643
  • 査読あり / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] foxl3 is a germ cell-intrinsic factor involved in sperm-egg fate decision in medaka. (2015)
  • 著者名/発表者名: Nishimura, T., Sato, T., Yamamoto, Y., Watakabe, I., Ohkawa, Y., Suyama, M., Kobayashi, S. and Tanaka, M.
  • 雑誌名: Science 巻: 349 ページ: 328 - 331
  • DOI: DOI:10.1126/science.aaa2657
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [学会発表] 未定 (2016)
  • 著者名/発表者名: 田中実
  • 学会等名: 第６１回日本生殖医学会
  • 発表場所: パシフィコ横浜（神奈川）
  • 年月日: 2016-11-03 – 2016-11-03
  • 招待講演
• [学会発表] An Intrinsic Mechanism of Sexual Fate Decision in Germ Cells (2016)
  • 著者名/発表者名: Minoru Tanaka
  • 学会等名: 8th international symposium of fish endocrinology
  • 発表場所: Gothenburg (Sweden)
  • 年月日: 2016-06-28 – 2016-07-02
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Sex of Germline Stem Cells (2016)
  • 著者名/発表者名: Minoru Tanaka
  • 学会等名: 3rd Macau Symposium on Biomedical Sciences 2016
  • 発表場所: the University of Macau (China)
  • 年月日: 2016-05-23 – 2016-05-26
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] 「生殖細胞の性の研究」から見えてきたこと; 卵巣中でも機能的精子は作られる - (2016)
  • 著者名/発表者名: 田中実
  • 学会等名: 第３０回 生殖・発生毒性学東京セミナー
  • 発表場所: 国立オリンピック記念青少年総合センター（渋谷区 東京）
  • 年月日: 2016-03-04 – 2016-03-04
  • 招待講演
• [学会発表] Reproduction : from medaka (O.latipes) to Paiche (Arapaima gigas) (2016)
  • 著者名/発表者名: Carranza, H. and Tanaka, M.
  • 学会等名: BMK meeting
  • 発表場所: Kyushu Univ, Fukuoka
  • 年月日: 2016-01-20 – 2016-01-22
  • 国際学会
• [学会発表] Role of RA-signalling in spermatogonial differentiation in medaka. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kikuchi, M. and Tanaka, M.
  • 学会等名: BMK meeting
  • 発表場所: Kyushu Univ, Fukuoka
  • 年月日: 2016-01-20 – 2016-01-22
  • 国際学会
• [学会発表] 「生殖細胞と体細胞の性が異なると,,, 」 (2015)
  • 著者名/発表者名: 田中実
  • 学会等名: 第７回泌尿器抗加齢医学研究会
  • 発表場所: 梅田スカイビル （大阪市 大阪府）
  • 年月日: 2015-12-13 – 2015-12-13
  • 招待講演
• [学会発表] 栄養制限によるメダカ性分化への影響 (2015)
  • 著者名/発表者名: 栄雄大、西村俊哉、田中実
  • 学会等名: 日本動物学会中部支部大会
  • 発表場所: 三重大学 （津市 三重県）
  • 年月日: 2015-11-28 – 2015-11-28
• [学会発表] Eggs or Sperm ; How is the fate of germ cells is determined. (2015)
  • 著者名/発表者名: Minoru Tanaka
  • 学会等名: The 5th International Symposium of Oryzias Fish
  • 発表場所: MahaSarakham (Thailand)
  • 年月日: 2015-11-12 – 2015-11-14
  • 国際学会
• [学会発表] New Roles of Germ Cells - Sex Determination and Fecundity (2015)
  • 著者名/発表者名: Minoru Tanaka
  • 学会等名: COS-Lecture
  • 発表場所: University of Heidelberg, (Germany)
  • 年月日: 2015-10-26 – 2015-10-26
  • 招待講演
• [学会発表] Germ Stem Cells and Sex Differentiation in Vertebrates (2015)
  • 著者名/発表者名: Minoru Tanaka
  • 学会等名: 6th course developmental biology
  • 発表場所: Institute Curie, Paris (France)
  • 年月日: 2015-10-12 – 2015-10-25
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] ゼブラフィッシュ精子形成全過程をカバーする細胞培養系の確立 (2015)
  • 著者名/発表者名: 酒井則良
  • 学会等名: 日本動物学会第86回大会
  • 発表場所: 朱鷺メッセ（新潟市 新潟県）
  • 年月日: 2015-09-17 – 2015-09-19
  • 招待講演
• [学会発表] ゼブラフィッシュ胚および稚魚の個体移植法の確立とその応用 (2015)
  • 著者名/発表者名: 河崎敏広、酒井則良
  • 学会等名: 日本動物学会第86回大会
  • 発表場所: 朱鷺メッセ（新潟市 新潟県）
  • 年月日: 2015-09-17 – 2015-09-19
• [学会発表] 減数分裂異常を示すENU-inducedゼブラフィッシュ変異体itsの解析 (2015)
  • 著者名/発表者名: 竹本一政、斉藤憲二、酒井則良
  • 学会等名: 日本動物学会第86回大会
  • 発表場所: 朱鷺メッセ（新潟市 新潟県）
  • 年月日: 2015-09-17 – 2015-09-19
• [学会発表] 「性と生殖; 生殖細胞の性決定」 (2015)
  • 著者名/発表者名: 田中実、北野潤
  • 学会等名: 第８６回日本動物学会大会シンポジウム （主催）
  • 発表場所: 朱鷺メッセ（新潟市 新潟県）
  • 年月日: 2015-09-17 – 2015-09-17
• [学会発表] Germ Cells and Sex Determination (2015)
  • 著者名/発表者名: Minoru Tanaka
  • 学会等名: The 1831st Biological Symposium
  • 発表場所: 国立遺伝学研究所（三島市 静岡県）
  • 年月日: 2015-07-28 – 2015-07-28
  • 招待講演
• [学会発表] 「遺伝子ノックダウン法による生体機能解析」 (2015)
  • 著者名/発表者名: 田中実
  • 学会等名: ファイザー講演会（日本小児内分泌学会主催）
  • 発表場所: アキバホール（千代田区 東京）
  • 年月日: 2015-07-11 – 2015-07-11
  • 招待講演
• [学会発表] A Picture of Sex Determination (2015)
  • 著者名/発表者名: Minoru Tanaka
  • 学会等名: The 48th SSR Meeting (全米生殖学会)
  • 発表場所: Puerto Rico (USA)
  • 年月日: 2015-06-18 – 2015-06-21
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Differentiation of spermatogonial stem cells to functional sperm in culture. (2015)
  • 著者名/発表者名: Sakai, N., Kawasaki, T.
  • 学会等名: The 48th SSR Meeting (全米生殖学会)
  • 発表場所: Puerto Rico (USA)
  • 年月日: 2015-06-18 – 2015-06-21
  • 国際学会
• [学会発表] Germline Sex Determination in Medaka (2015)
  • 著者名/発表者名: Minoru Tanaka
  • 学会等名: The 7th International Symposium of Vertebrate Sex Determination
  • 発表場所: Kona (USA)
  • 年月日: 2015-04-13 – 2015-04-17
  • 国際学会 / 招待講演
• [図書] 「発生生物学(Developmental Biology)第10版」性決定の章 (2015)
  • 著者名/発表者名: 田中実 (翻訳)
  • 総ページ数: 525-554
  • 出版者: メディカル・サイエンス・インターナショナル
• [備考] 基礎生物学研究所 生殖遺伝学研究室
  • URL: www.nibb.ac.jp/reprogenetics/
• [備考] 国立遺伝学研究所 小型魚類開発研究室
  • URL: https://www.nig.ac.jp/labs/FishDev/index.html