| 研究課題/領域番号 |
25252011
|
|---|
| 研究機関 | 岡山大学 |
|---|
研究代表者 |
鈴木 信弘 岡山大学, その他部局等, 教授 (70206514)
|
|---|
| 研究分担者 |
中屋敷 均 神戸大学, (連合)農学研究科(研究院), 教授 (50252804)
近藤 秀樹 岡山大学, その他部局等, 准教授 (40263628)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2017-03-31
|
| キーワード | RNA サイレンシング / 菌類ウイルス / マイコウイルス / 宿主免疫 / クリ胴枯病菌 / イネいもち病菌 / 白紋羽病菌 / マイコイミュニティ |
|---|
| 研究実績の概要 |
大課題A,B,Cのうち、A.「宿主菌によるウイルス(分子パターン)認識、防御機構および宿主ウイルス防御への反撃機構の解明」、B. 「DNAを介したウイルス防御反応の解明」を遂行した。A2, A3, B4は昨年度引き続き進めた。
A2 子のう菌RNAiにおけるウイルス(分子パターン)認識機構の解明は以下のアプローチで進めた。まず、クリ胴枯病菌 ku70/80 破壊系統(任意の遺伝子 の破壊株作成効率が極めて高い)、ハイポウイルス delta-p69 感染性cDNA, dcl2転写開始500b上流配列を用いたレポーター系を確立した。この菌株にランダム変異を導入し、RNAiウイルス誘導に関与する宿主因子の探索を進め、候補遺伝子を数個同定した。
A5 自然免疫としてのRNAiのマイコウイルス感染における意義の解明に向けて取り組む。RNAi欠損株と野生型菌にRosellinia necatrix partitivirus 6, Rosellinia necatrix partitivirus 3を導入し、それらの挙動を両株間で比較した結果、RnPV6はRNAiに耐性を、RnPV3は感受性を示した。
A7 染色体内在化ウイルスDNA(元々はRNAまたはDNAウイルス)の防御反応での機能では、予め染色体に組み込まれた配列が、ウイルス感染以前に2本鎖RNAの供給源になっている可能性を探ったが、陰性であった。B4 DNAウイルスと宿主RNAiを介したせめぎ合いでは、感染性のジェミニ様DNAウイルス（SsHADV1）が現在まで得られなかった。今年度は、いもち病菌MAGGY(メタウイルス科に属するレトロトランスポゾン)を用い、RNAiとのせめぎ合いを解析した。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
実験はほぼ予定通り遂行した。A5では、同じパルティティウイルスでありながら、RNAiに対する感受性が異なるなど、興味深い予期しなかった成果も得られた。さらに、A2では順調にウイルス誘導RNAiに関与する因子（認識に関与する因子も含む）の同定に成功し、大きな成果となった。一方で、菌類感染性のDNAウイルスの単離には前年度同様至っていない。また、A6 RNAiシグナルは菌細胞間移行するか？も若干積み残しとなった。これらは、当初の予定課題と共にH28年度に遂行する。
|
| 今後の研究の推進方策 |
来年度も、大課題A,B,Cのうち、A.「宿主菌によるウイルス(分子パターン)認識、防御機構および宿主ウイル ス防御への反撃機構の解明」、B. 「DNAを介したウイルス防御反応の解明」を遂行する。さらに A2, A3, B4は昨年度引き続き進める。
A2 子のう菌RNAiにおけるウイルス(分子パターン)認識機構では、既に得られた宿主変異遺伝子の更なる解析をすすめることで、ウイルス誘導性RNAiの機構を解明する。
A6 RNAiシグナルは菌細胞間移行するか？では、植物由来のrdr(RDRP6)による相補試験を実施する（積み残し分）。A7 染色体内在化ウイルスDNA(元々はRNAまたはDNAウイルス)の防御反応での機能では、引き続き予め染色体に組み込まれた配列が、ウイルス感染以前に2本鎖RNAの供給源になっている可能性を探る。C8 免疫不全植物病原糸状菌系統の作出では、ウイルス防御に関わる遺伝子(RNAi、Xrn1等)の多重破壊株を作成し、免疫不全株を作出する。
|
