| 研究課題/領域番号 |
25282143
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| 研究機関 | 富山大学 |
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研究代表者 |
二階堂 敏雄 富山大学, 事務局, 理事 副学長 (50180568)
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| 研究分担者 |
吉田 淑子 富山大学, 大学院医学薬学研究部(医学), 准教授 (00171421)
相古 千加 富山大学, 大学院医学薬学研究部(医学), 助教 (10523889)
岡部 素典 富山大学, 大学院医学薬学研究部(医学), 助教 (60283066)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| キーワード | 羊膜細胞 / 乾燥羊膜 |
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| 研究実績の概要 |
患者よりインフォームドコンセントを得て、胎盤組織から羊膜を採取し、トリプシン処理により上皮細胞（HAE)、コラゲナーゼ処理により間葉系細胞（HAM)を分離、回収した。また、このようにして採取したHAE、HAMに遺伝子を導入し、不死化羊膜上皮細胞（iHAE）、不死化羊膜間葉系細胞(iHAM)を樹立している。これらの細胞を培養し、以下の実験に用いた。胚性幹細胞や誘導型多能性幹細胞（iPS 細胞）の培養にはfeeder細胞を用いることが一般的であるが、作業の煩雑さやコンタミネーションの懸念からfeeder free培養系の確立が求められている。lamininコートした培養皿でHAEを培養したところ、cluster様の細胞塊が形成されることが観察された。通常の接着状態で培養されたHAEは幹細胞関連因子Oct3/4は核、細胞質の両方に局在するが、この細胞塊では核のみに局在し、幹細胞としての性質をより強く示した。また、iHAEにPdx1,MafAなどの膵関連因子を導入し膵細胞への分化を誘導した。Pdx1導入後培養2か月、3か月にインスリンの発現が転写レベルで検出され、インスリン産生が誘導されたことが示された。streptzotosinを投与により作製した糖尿病モデルマウスにこのPdx1導入HAEを移植し、血糖値の抑制が観察された。SCID関節炎モデルを作成しHAMを移植することにより、関節炎の治癒効果があることを示した。羊膜細胞の免疫抑制効果をin vivoで示すものである。
我々がこれまでに開発したハイパードライ乾燥羊膜を眼科、脳神経外科、耳鼻咽喉科、歯科口腔外科の多領域において治療に用い、自家組織や人工素材を用いた治療と比較して有用であった。
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| 現在までの達成度 (段落) |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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| 今後の研究の推進方策 |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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| 次年度使用額の使用計画 |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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