研究課題/領域番号 |
25282212
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研究機関 | 筑波大学 |
研究代表者 |
溝上 裕士 筑波大学, 医学医療系, 准教授 (70268556)
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研究分担者 |
柳川 徹 筑波大学, 医学医療系, 准教授 (10312852)
宇都宮 洋才 和歌山県立医科大学, 公私立大学の部局等, 准教授 (60264876)
磯辺 智範 筑波大学, 医学医療系, 准教授 (70383643)
蕨 栄治 筑波大学, 医学医療系, 講師 (70396612)
正田 純一 筑波大学, 医学医療系, 教授 (90241827)
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研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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キーワード | 生活習慣病 / 過食肥満マウス / 脂肪性肝炎 / 腸内細菌叢 / 自然免疫 |
研究実績の概要 |
p62:Nrf2-DKO NASH自然発症モデルマウスを用いて,腸内環境に主眼をおき,NASHの発症メカニズムについて探索した.野生型,p62-KO,Nrf2-KO,DKOマウスの肝,腸管を解析した.各系統のマウスにおいてNASH発症前後の糞便中LPS含有量を測定した.また,糞便中より16sRNAを抽出し,T-RFLP法により腸内細菌叢を測定した. FITCデキストラン経口投与により腸管透過性を評価した.さらに血清中LPS含有量を測定した.動物用小型MRIによる肝SPIO-MRIでKupffer細胞の貪食能を評価した. フローサイトメトリーによりKupffer細胞を単離し細胞機能を解析した.NASH発症前:DKOマウスは,糞便中LPS含量と腸内細菌叢の解析において,野生型に比べ有意な差が認められなかった.しかし,FITCデキストランの腸管透過性の亢進が観察された.また,Kupffer細胞におけるSPIOの取り込み能が,野生型に比べ減弱していた.さらにフローサイトメトリーにより詳細な解析を行ったところ,野生型と比べ,Kupffer細胞における貪食陽性率が低下していた.NASH発症後:DKOマウスでは,野生型に比べ,糞便中LPS含量が有意に増加しており,腸内細菌叢の解析ではグラム陰性菌であるPrevotellaが増加していた.血清中LPS含有量も増加していた.なおp62-KOおよびNrf2-KOにおけるこれら表現型の変化はDKOマウスに比較して軽微であった.DKOマウスにおけるNASH発症メカニズムには,過食肥満の病態下における腸内環境変化によるLPS産生増加,肝のLPSに対する異物排除機構の障害,これに関連した自然免疫反応の亢進が重要であると考えられた.
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
NASH発症メカニズムには,過食肥満の病態下における腸内環境変化によるLPS産生増加,また,肝のLPSに対する異物排除機構の障害,これに関連した自然免疫反応の亢進が重要であるとの病態的キーポントを確認出来た.
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今後の研究の推進方策 |
腸内細菌叢では、グラム陰性菌であるPrevotellaが有意に増加していたことより,Prevotellaに関して,LPS産生能力および腸管上皮の障害生について検討する。特に,腸管透過性が亢進に関連して、腸管上皮のタイトジャンクションタンパク質の発現レベルについて検討を行う。
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