研究課題
「光をあてた細胞のみで細胞質内にRNAを導入する技術」(PCDR技術)をベースに「可視光および近赤外光による細胞機能の制御系」を開発する。そのポイントは、①近赤外光で効率よく細胞質内RNA導入を起こせるようにすること、②複数波長の光による複数のRNA導入のタイミングの制御を可能にすること、③光でRNA導入を誘導する方法を３次元的な細胞集団や動物個体に適用すること、④「光による細胞機能の制御系」の例として、光による細胞内翻訳の人工制御系および光による細胞分化誘導系を構築することである。近赤外光による細胞質内RNA導入法については、キャリアの光増感部位を変えてRNA導入効率の比較検討を行い、この波長域におけるRNA導入の光誘導が可能になった。複数波長の光による複数のRNA導入のタイミングの制御については赤色光と近赤外光による異なるRNA種の時間差導入が可能になった。光でRNA導入を誘導する方法を３次元的な細胞集団に適用することについては、EGFP安定発現CHO細胞から成るスフェロイド内の1細胞に対してPCDR法によりRNAの導入とRNAi誘導を示すことができた。動物個体に関しては線虫へのPCDR法の適用に取り組み、光照射部位特異的なRNA導入とRNAi効果を明確に示せてはいないが、光照射部位における蛍光標識RNAの細胞質内拡散を示すと考えられる蛍光上昇は見られた。「光による細胞機能の制御系」については神経細胞分化をモデルとして取り扱った。神経細胞分化に関わる新規のmiRNAをマイクロアレイ法により見つけるとともに、既知のmiRNAを用いてPCDR法による分化誘導を試みた。導入のタイミングによる神経分化誘導効率の違いを見いだすには、今後も更なる検討が必要である。
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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