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2015 年度 実績報告書

大規模DNA情報を活用した正確かつ迅速な種多様性評価技術の開発

研究課題

研究課題/領域番号 25289172
研究機関愛媛大学

研究代表者

渡辺 幸三  愛媛大学, 理工学研究科, 准教授 (80634435)

研究分担者 大村 達夫  東北大学, 未来科学技術共同研究センター, 教授 (30111248)
加藤 幹男  大阪府立大学, 高等教育推進機構, 教授 (30204499)
三宅 洋  愛媛大学, 理工学研究科, 准教授 (90345801)
研究期間 (年度) 2013-04-01 – 2016-03-31
キーワードDNA種分類 / 次世代シークエンシング / 底生動物 / 河川 / 種多様性 / 系統発生
研究実績の概要

課題2「DNA型コピー数平準化法の開発」では,多くの一本鎖DNAが再会合し,わずかの一本鎖DNAが残存した状態がコピー数平準化に最適な会合条件と考え,最適な再会合の温度と時間の条件を実験的に検索した。その結果,70℃で1分間の再会合が最適条件として検索された。この条件の下,群集アンプリコンの熱変性-再会合処理を行い,処理を行わない系も比較対象として準備をした。そして,群集構造をDGGE法で比較した結果,全体として,各ハプロタイプの存在量の平準化効果を確認することはできなかった。この原因として,類似した配列同士が再会合反応時にヘテロ2重鎖を形成してしまったことが考えられた。
課題3「次世代シークエンスによる大規模DNAデータベースの構築」では,課題1で採取した群集サンプルを使って,重信川流域の種数を評価した。形態同定の結果,重信川流域では8,921個体から64分類群(1綱,4目,2科,4亜科,16属,37種)が発見された.個体数が最も多い分類群は3,144個体のユスリカ亜科だった.次世代シークエンシングによるミトコンドリアDNAのCOI領域(658塩基長)を対象としたアンプリコン解析で得られた165,508配列の内,DNAバーコーディングにより39,337配列から成る128種が同定された.各分類群における個体数とDNA配列数に正の相関が見られた。
課題4「進化モデル解析によるDNA種数の定量化」では,課題3で作成されたデータベースを進化モデルに基づくDNA種分類法に適用し,流域内の全DNA種数を定量化した。,単純な進化系統樹を使って種数を定量できるPTPモデルを使ってDNA種分類を行った。その結果,重信川流域に298種の存在が推定された.また,ニューラルネットワークの一種である自己組織化マップ(SOM)を用いたアプローチで,集団遺伝構造と共に,河川の水質・物理環境の影響を受けている遺伝子集団を解明することができた。

現在までの達成度 (段落)

27年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

27年度が最終年度であるため、記入しない。

次年度使用額が生じた理由

27年度が最終年度であるため、記入しない。

次年度使用額の使用計画

27年度が最終年度であるため、記入しない。

  • 研究成果

    (23件)

すべて 2016 2015 その他

すべて 国際共同研究 (2件) 雑誌論文 (4件) (うち国際共著 1件、 査読あり 4件、 オープンアクセス 2件、 謝辞記載あり 4件) 学会発表 (15件) (うち国際学会 10件、 招待講演 1件) 学会・シンポジウム開催 (2件)

  • [国際共同研究] ライプニッツ淡水生態学・内水漁業研究所(ドイツ)

    • 国名
      ドイツ
    • 外国機関名
      ライプニッツ淡水生態学・内水漁業研究所
  • [国際共同研究] 釜山大学校/ソウル大学(韓国)

    • 国名
      韓国
    • 外国機関名
      釜山大学校/ソウル大学
  • [雑誌論文] Identification of Outlier Loci Responding to Anthropogenic and Natural Selection Pressure in Stream Insects Based on Self-Organizing Map2016

    • 著者名/発表者名
      Bin Li, Kozo Watanabe, Dong-Hwan Kim, Sang-Bin Lee, Muyoung Heo, Heui-Soo Kim and Tae-Soo Chon
    • 雑誌名

      Water

      巻: 8(5) ページ: 188

    • DOI

      10.3390/w8050188

    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] 水文モデルと底生動物の生息場モデルを用いた河川健全度パターンの評価2016

    • 著者名/発表者名
      糠澤桂,風間聡,渡辺幸三
    • 雑誌名

      土木学会論文集B1(水工学)

      巻: Vol.72, No.4 ページ: I_433-I_438

    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Characterization of Genes Coding for Histone H3, 18S rRNA, and Cytochrome oxidase subunit I of East Asian Mayflies (Ephemeroptera)2016

    • 著者名/発表者名
      Kei Wakimura, Yasuhiro Takemon, Atsushi Takayanagi, Shin-ichi Ishiwata, Kozo Watanabe, Kazumi Tanida, Nobuyoshi Shimizu, and Mikio Kato
    • 雑誌名

      DNA Barcodes

      巻: 4 ページ: 1-25

    • DOI

      10.1515/dna-2016-0001

    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] ダムおよび瀬切れによる河川分断化がエルモンヒラタカゲロウの地域間交流に及ぼす影響の遺伝的評価2015

    • 著者名/発表者名
      八重樫咲子,不破直人,山崎久美子,三宅洋,渡辺幸三
    • 雑誌名

      土木学会論文集G(環境)

      巻: Vol.71, No.7 ページ: III_115-III_122

    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [学会発表] Different ways of sperm transfer among the Capniidae (plecoptera), and its importance in the generic system of the family2016

    • 著者名/発表者名
      D. Muranyi, W.H. Li, M. Gamboa, K. Watanabe
    • 学会等名
      The 3rd Symposium of Benthological Society of Asia
    • 発表場所
      Vladivostok・Rossia
    • 年月日
      2016-08-24 – 2016-08-26
    • 国際学会
  • [学会発表] Systematic revision of the Asian Capniidae (Plecoptera)2016

    • 著者名/発表者名
      David Muranyi, Maribet Gamboa, Jeong Mi Hwang, Yeon Jae Bae, Kozo Watanabe
    • 学会等名
      Annual Meeting of the Entomological Society of Korea
    • 発表場所
      Daegu・Korea
    • 年月日
      2016-05-11 – 2016-05-16
    • 国際学会
  • [学会発表] Advancement of genome analysis in aquatic insects2016

    • 著者名/発表者名
      Kozo Watanabe
    • 学会等名
      Seminar for Genetics-Ecology-Evolution-Modeling
    • 発表場所
      Busan・Korea
    • 年月日
      2016-03-19 – 2016-03-19
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] 次世代シークエンシングを用いた河川水生昆虫の遺伝的多様性の評価2016

    • 著者名/発表者名
      八重樫咲子,戸高涼太郎,三宅洋,渡辺幸三
    • 学会等名
      第50回日本水環境学会年会
    • 発表場所
      アスティとくしま(徳島市・徳島県)
    • 年月日
      2016-03-16 – 2016-03-16
  • [学会発表] Projected adaptive genetic degradation in a caddisfly species under changing climates2016

    • 著者名/発表者名
      Kei Nukazawa, So Kazama , Kozo Watanabe
    • 学会等名
      11th International Symposium on Ecohydraulics
    • 発表場所
      Melbourne・Australia
    • 年月日
      2016-02-12 – 2016-02-12
    • 国際学会
  • [学会発表] 塩基配列コピー数平準化法によるメタゲノムを用いた種多様性評価の改善2015

    • 著者名/発表者名
      福田航平,加藤幹男,八重樫咲子,渡辺幸三
    • 学会等名
      応用生態工学会第19回大会
    • 発表場所
      日本大学(郡山市・福島県)
    • 年月日
      2015-09-10 – 2015-09-10
  • [学会発表] 次世代シークエンシングとDNA種分類法を用いた河川底生動物群集の種多様性評価2015

    • 著者名/発表者名
      泉昂佑,Maribet Gamboa,三宅洋,渡辺幸三
    • 学会等名
      応用生態工学会第19回大会
    • 発表場所
      日本大学(郡山市・福島県)
    • 年月日
      2015-09-10 – 2015-09-10
  • [学会発表] Projecting adaptive genetic variation and species distribution of stream insects under changing climates2015

    • 著者名/発表者名
      Kei Nukazawa, So Kazama, Kozo Watanabe
    • 学会等名
      The 5th China-Japan-Korea Colloquium on Mathematical Biology
    • 発表場所
      Kyoto・Japan
    • 年月日
      2015-08-27 – 2015-08-27
    • 国際学会
  • [学会発表] Gene-environmental wide association as a predictor of species distribution2015

    • 著者名/発表者名
      Maribet Gamboa, Kozo Watanabe
    • 学会等名
      The 5th China-Japan-Korea Colloquium on Mathematical Biology
    • 発表場所
      Kyoto・Japan
    • 年月日
      2015-08-27 – 2015-08-27
    • 国際学会
  • [学会発表] Species diversity of Trichoptera in a semi-natural Tagliament River (Italy) revealed by Poisson Tree Processes model2015

    • 著者名/発表者名
      Sakiko Yaegashi, Shunsuke Kondoh, Kozo Watanabe
    • 学会等名
      The 5th China-Japan-Korea Colloquium on Mathematical Biology
    • 発表場所
      Kyoto・Japan
    • 年月日
      2015-08-27 – 2015-08-27
    • 国際学会
  • [学会発表] Estimating periphyton dynamics in a temperate catchment using a hydrological simulation2015

    • 著者名/発表者名
      Watanabe Kozo, Nukazawa Kei, Aita S, Kazama So
    • 学会等名
      26th International Union of Geodesy and Geophysics (IUGG) general assembly
    • 発表場所
      Prague・Czech Republic
    • 年月日
      2015-06-22 – 2015-06-22
    • 国際学会
  • [学会発表] Towards the generic revision of Capniidae (Plecoptera): synopsys of the East Palaearctic genera2015

    • 著者名/発表者名
      David Muranyi, Maribet Gamboa, Kozo Watanabe, Weihai Li
    • 学会等名
      Meeting of the XIV International Conference on Ephemeroptera and XVIII International Symposia of Plecoptera
    • 発表場所
      Aberdeen・UK
    • 年月日
      2015-05-31 – 2015-05-31
    • 国際学会
  • [学会発表] Gene expression changes governing thermal adaptation of stoneflies in Japan2015

    • 著者名/発表者名
      Maribet Gamboa, Yusuke Gotoh, and Kozo Watanabe
    • 学会等名
      Meeting of the XIV International Conference on Ephemeroptera and XVIII International Symposia of Plecoptera
    • 発表場所
      Aberdeen・UK
    • 年月日
      2015-05-31 – 2015-05-31
    • 国際学会
  • [学会発表] 次世代DNA解析による種多様性評価の正確性向上を目的としたDNA型コピー数平準化法の開発2015

    • 著者名/発表者名
      福田航平,加藤幹男,渡辺幸三
    • 学会等名
      土木学会四国支部第21回技術研究発表会
    • 発表場所
      香川大学(高松市・香川県)
    • 年月日
      2015-05-23 – 2015-05-23
  • [学会発表] 次世代DNAシークエンシングとDNA種分類法を用いた河川底生動物群集の種多様性評価技術の開発2015

    • 著者名/発表者名
      泉昂佑,Maribet Gamboa,三宅洋,渡辺幸三
    • 学会等名
      土木学会四国支部第21回技術研究発表会
    • 発表場所
      香川大学(高松市・香川県)
    • 年月日
      2015-05-23 – 2015-05-23
  • [学会・シンポジウム開催] Seminar for Genetics-Ecology-Evolution-Modeling2016

    • 発表場所
      Pusan National University (Busan・Korea)
    • 年月日
      2016-03-19 – 2016-03-19
  • [学会・シンポジウム開催] Special session "Ecological modeling: from genes to communities" in The 5th China-Japan-Korea Colloquium on Mathematical Biology2015

    • 発表場所
      同志社大学(京都市・京都府)
    • 年月日
      2015-08-27 – 2015-08-27

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公開日: 2017-01-06  

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