| 研究課題/領域番号 |
25290039
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| 研究機関 | 国立研究開発法人医薬基盤・健康・栄養研究所 |
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研究代表者 |
松田 潤一郎 国立研究開発法人医薬基盤・健康・栄養研究所, 疾患モデル小動物研究室, 研究リーダー (60181731)
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| 研究分担者 |
木村 展之 国立研究開発法人国立長寿医療研究センター, アルツハイマー病研究部, 室長 (80392330)
高橋 一朗 国立研究開発法人医薬基盤・健康・栄養研究所, 霊長類医科学研究センター, 再雇用職員 (90171470)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| キーワード | 疾患モデル動物 / アルツハイマー病 / 加齢 |
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| 研究実績の概要 |
神経細胞特異的に細胞内輸送機能を低下させることで、脳の老年性（加齢性）変化を再現する孤発性アルツハイマー病モデルマウスの作出を目的とした。
Tet-onシステムによりテトラサイクリン刺激応答性に軸索輸送モーター蛋白であるdynein特異的shRNAを神経細胞特異的に発現するマウスの作成として、tTS-tetO-hU6-dynein shRNA Tg（トランスジェニック）マウス4ラインと、CaMK2a-rtTA Tgマウスとの交配を行い、目的のダブルTgマウス3ラインを得た。これらのマウスに4週間ドキシサイクリンを継続投与し、神経細胞特異的にdyneinの発現が抑制され、エンドサイトーシス障害による神経伝達機能低下が引きおこされ、アルツハイマー病モデルマウスとなるかどうかを検討した。Y迷路を用いた行動学的解析の結果、残念ながら新規作成マウスではいずれのラインにおいても明確な認知機能低下が確認されなかった。各マウスを安楽殺解剖して海馬組織を取り出し、蛋白質を抽出してwestern blot法による検索を行ったところ、いずれのラインにおいても明確なdyneinの発現抑制効果が確認されなかった。昨年度までの成果により、今回のマウス作成に用いた遺伝子コンストラクトは全て、in vitro実験系においては有意なdyneinのノックダウンが認められている。このことから、今回作成したマウスの脳内でdyneinのノックダウンが確認されなかったのは、発現させたshRNA配列に問題があるというよりもむしろ、十分なshRNA発現量が得られなかったことに起因すると考えられる。今後は、より強力に下流の遺伝子を発現させるプロモーターを用いた改良型遺伝子コンストラクトを作成し、新たなアルツハイマー病モデルマウスの開発に取り組みたい。
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| 現在までの達成度 (段落) |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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| 今後の研究の推進方策 |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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| 次年度使用額の使用計画 |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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