|
これまでタバコBY-2細胞などを材料に細胞内構造をラベルした細胞（可視化細胞）やイメージング・画像定量解析およびシミュレーションの手法を独自に開発して、細胞骨格等の動態や細胞形態形成の画像情報処理による解析を行ってきた。これらの経験をもとに、本申請研究では、モデルとしてのBY-2細胞から複雑な形態をとるシロイヌナズナ葉表皮細胞の形態形成過程における細胞形状と細胞連結様式を組織レベルで可視化した。並行して、表層微小管、アクチン繊維、分泌小胞などの細胞内構造の動態のイメージングを実施して、これらの細胞内構造が制御する葉表皮組織における細胞形態形成機構を多角的に検討した。具体的には、前年度までと同様に細胞膜の撮像と画像解析を継続的に実施するとともに、GFP-tubulin発現株などを用いて実施した表層微小管などの細胞骨格構造の撮像および解析を行った。細胞骨格の観察には高感度での蛍光検出が可能なスピニング式共焦点レーザー顕微鏡システムを用いたが、それとともに細胞骨格に伴って運ばれる小胞の検出には近年購入した全反射顕微鏡を利用した。また、セルラーゼ処理により細胞伸長方向に対して垂直な向きに組織化された微小管が高頻度に出現すること、微小管の組織化に関わる欠損変異体ではセルラーゼ処理による細胞壁湾曲の低減が起こりにくいこと、などを見出した。さらに、力学モデル解析によって表層微小管と細胞形状の関係の理解を進めた。
|
