減数分裂期前期の相同染色体の相互認識・対合は相同組換えの前にすでに完了しているが、しかし、相同染色体同士がどのようにお互いに見つけて対合する分子メカニズムはほとんど不明である。申請者が分裂酵母において、減数分裂期に転写され、転写されるsme2遺伝子ローカスに集積する非コードRNAのmeiRNA-Lが相同染色体を積極的に繋ぎとめる役割をしていることを発見した。本申請研究では、染色体相互認識における染色体集積RNAの作用機構ならびに分子メカニズムの解明を目的としている。新規のmeiRNA-L結合タンパク質の同定をめざし、今年度は既存の本研究室作成した分裂酵母GFPライブラリ及び理研のYFP融合ライブラリの発表されたデータベースから、核内蛍光ドットを示すものを検索した。染色パタンから候補株を集めて、減数分裂期の蛍光局在を観察した。減数分裂期前期の核内で1~数個の蛍光ドットを示す株について、sme2遺伝子座にドットを形成するMei2-mcherry株とかけ合わせ、共局在を確かめた。その結果、sme2ローカスと共局在を示すタンパク質が複数同定できた。特に重要なのはこれらのタンパク質の多くがsme2ローカスのみならず、sme2ローカス以外にも複数の蛍光ドット状染色が見られた。このことから、sme2対合サイト以外にも対合サイトが存在する可能性を示された。今後、これらのタンパク質のsme2対合活性への関与、また、sme2ローカス以外のドットの染色体局在部位などを解明していきたい。
|