研究課題
[全体構想] 全世界の人獣に甚大な被害を与えているのにもかかわらず、未だ有効で安全な防御・治療法が確立されていないフタトゲチマダニの新規防圧法を最終目標とする。我々はマダニの吸血および病原体感染防御において重要な役割を担うと考えられるToll情報伝達経路を構成するToll様受容体(TLR)とTRAF関連因子(TRAFD1)を阻害標的するRNA干渉法とワクチンを開発し、マダニ防圧に活用することを本研究の最終目標とした。[今まで得られた成果] そこで、マダニの吸血および病原体感染防御において重要な役割を担うと考えられるToll 情報伝達経路を構成するToll 様関連因子(TLR)とTRAF関連因子(TRAFD1)の同定・特性についてRNA干渉法を用いて解明した。発育期別のマダニおよび各吸血日数別の成ダニ個体とその臓器のTLRとTRAFD1遺伝子並びにタンパク質の発現動態を調べたところ、TLRとTRAFD1の発現は吸血に伴って増大するが、飽血後数週間で著しく減少することが分かった。また、間接蛍光抗体法によりTLRとTRAFD1はマダニの唾液腺、中腸、卵巣の細胞膜付近に局在していることが分かった。さらに、TRAFD1遺伝子をノックダウンすると、成ダニの吸血および産卵数に影響はないが、マダニの自然免疫関連分子であるディフェンシン様分子の発現が抑制された。一方、TLRはマダニによって媒介するバベシア原虫の増殖を抑制する機構に関与することが分かった。以上の結果より、TLRとTRAFD1はマダニの吸血や産卵には影響しないが、マダニの自然免疫系を制御する重要な分子である可能性が考えられた。
2: おおむね順調に進展している
最終段階で予想しない結果になったが、それまでは当初の計画通りの研究成果が得られたため。
平成27年10月、dsRNA遺伝子キャリアーを用いたフェリチンのRNA干渉法試験の結果、当初の予想に反し、マダニの遺伝子制御が認められなかったため、フェリチンのdsRNA遺伝子キャリアーの作製に問題があるという考察に至った。dsRNA遺伝子キャリアーの問題を解決するために、フェリチンに代わる新たな標的分子としてフェリチンと同様の抗酸化活性を持つペルオキシレドキシンやグルタチオンSトランスフェラーゼに焦点を絞り、ペルオキシレドキシンやグルタチオンSトランスフェラーゼの詳細な分子活性などの評価を実施する。
平成27年10月、フェリチンのRNA干渉法試験の結果、当初の予想に反し、マダニの遺伝子制御が認められなかったため、フェリチンのdsRNA遺伝子キャリアーの作製に問題があるという考察に至った。そのため、その問題を解決するために、新たな標的分子としてフェリチンと同様の抗酸化活性を持つペルオキシレドキシンに焦点を絞った。その結果、ペルオキシレドキシンの詳細な分子活性などの評価を実施する必要性が生じた。
dsRNA遺伝子キャリアーの問題を解決するために、フェリチンに代わる新たな標的分子としてフェリチンと同様の抗酸化活性を持つペルオキシレドキシンやグルタチオンSトランスフェラーゼに焦点を絞り、ペルオキシレドキシンやグルタチオンSトランスフェラーゼの詳細な分子活性などの評価を実施する。
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すべて 雑誌論文 (9件) (うち国際共著 7件、 査読あり 9件、 謝辞記載あり 8件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (18件) (うち国際学会 2件、 招待講演 1件) 図書 (2件) 備考 (1件)
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