| 研究課題/領域番号 |
25292192
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| 研究機関 | 神戸大学 |
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研究代表者 |
宮野 隆 神戸大学, (連合)農学研究科(研究院), 教授 (80200195)
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| 研究分担者 |
平尾 雄二 国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構, その他部局等, 研究員 (10355349)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| キーワード | 応用動物 / 卵母細胞 / 卵胞 / 体外培養 / 顆粒膜細胞 |
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| 研究実績の概要 |
ウシおよびブタの初期胞状卵胞から，卵母細胞－卵丘細胞－顆粒膜細胞複合体あるいは卵母細胞－卵丘細胞複合体を採取して体外で培養し，以下の結果を得た。
１）直径約95μmの成熟能力をもたないウシ卵母細胞を含む卵母細胞－卵丘細胞－顆粒膜細胞複合体をエストラジオール17βとアンドロジェン（アンドロステンジオン，テストステロンまたはジヒドロテストステロン）をともに含む培養液中で2週間体外培養すると，卵母細胞の生存性は高く保たれ，卵母細胞は発育して成熟能力を獲得した。卵母細胞の成熟能力の獲得は，エストラジオール17β単独添加の場合よりアンドロジェンを併用した場合に促進され，この作用はアンドロジェンレセプター阻害薬によって抑制された。
２）直径約95μmのウシ卵母細胞を含む卵母細胞－卵丘細胞－顆粒膜細胞複合体をエストラジオール17βとアンドロステンジオンをともに含む培養液中で2週間体外培養することによって発育させた卵母細胞は，その後の体外成熟・体外受精によって精子の侵入を受けて正常に受精し，胚盤胞へと発生した。
３）直径約100μmのブタ卵母細胞を含む卵母細胞－卵丘細胞－顆粒膜細胞複合体あるいは卵母細胞－卵丘細胞複合体を2％ポリビニルピロリドン（PVP）とFSHを添加した培養液中で2週間培養すると，どちらの複合体もドーム様構造を形成し，卵母細胞は最終の大きさへと発育した。また，卵母細胞はその後の成熟培養によって成熟した。
４）2％ PVPを添加した培養液中で培養したブタ顆粒膜細胞では，無添加の場合よりも細胞外マトリックスに関連する遺伝子の発現が低下していた。この結果は，前年度までにマウスおよびウシで得られた結果と同様であった。
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| 現在までの達成度 (段落) |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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| 今後の研究の推進方策 |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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| 次年度使用額の使用計画 |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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