自然免疫を基軸としたウイルス性肝炎治療抵抗性機序の解明と新規治療法の創成

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 25293169
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 朝比奈 靖浩 東京医科歯科大学, 医歯(薬)学総合研究科, 寄附講座教授 (00422692)
• 研究分担者: 柿沼 晴 東京医科歯科大学, 医歯(薬)学総合研究科, 寄附講座講師 (30372444) ; 中川 美奈 東京医科歯科大学, 医歯学融合教育支援センター, 准教授 (30401342)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• キーワード: 自然免疫 / インターフェロン / HCV / HBV

研究実績の概要

末梢血単核球(PBMC)におけるIFN不応性に関わる宿主因子の探索： III型IFNとして新規に発見されたIFNλ4はIL28B SNPのマイナーアレルの症例のみに発現し、これまでの検討では肝内におけるIFNλ4の発現は治療不応性への関与が示唆された。そこで免疫担当細胞であるPBMCにおけるIFN不応性に関わる機序を解明するために、50例のC型慢性肝炎患者のPBMCにおいてIL28BおよびIFNλ4発現とIFN治療応答性の関連について検討した。PBMCを採取後IFNα+poly I:C刺激を行い、無刺激時・刺激時のIFNλ発現、他の自然免疫関連分子発現をRT-qPCRおよびRT-PCRにて解析し、前治療効果(Virological Responder(VR) vs NR)との関連をみた。その結果、無刺激時のIL28B発現レベルはIL28B SNPおよび治療効果との関連を認めなかったが、IFNα+poly I:C刺激によるIL28Bの発現誘導は前治療NR群が再燃例に比して有意にIL28B誘導が低値であり、SNPに関わらずNR群はVR群に比べ有意に低値であった。またMinor群のうち12名でPBMC中にIFNλ4 mRNAの発現が認められ、うち7名では無刺激時のPBMCに発現が認められた。そこで、Minor群のうち、無刺激のPBMC中にIFNλ4発現が検出された群（n=7）と非検出群（n=19）でIL28B発現誘導を比較したところ、IFNλ4検出群で有意にIL28B発現誘導が低値であり（p=0.04）、IFNλ4発現は治療不応性と関連していた。従って、PBMC中のIL28Bの発現誘導能はIFN治療応答性を規定すると考えられ、PBMC に発現するIFNλ4はIFN不応性機序へ関与することが示唆された。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

PBMCを用いた研究はおおむね順調に進展している。

今後の研究の推進方策

新規に発見されたIFNλ4はIL28B SNPのマイナーアレルの症例のみに発現しており、IFN不応性と関連している。しかし、IFN促進系・抑制系に関わるシグナル伝達に与える影響やIL28Bプロモーターに与える影響は不明であり、その受容体も同定されていない。今後さらいIFNλ4が治療不応性に関わる機序について解明し、治療標的としての意義を検討する。また、HBV感染患者ではIFN治療により核内に存在するcccDNAがクロマチン修飾を受け抑制されることが示唆されているが、自然免疫により内因性に誘導されるIFN及びISGがcccDNAに与える影響を解析することで、未だ完全制圧が困難なHBV感染の治療標的としての意義を検討する。

次年度使用額が生じた理由

試薬等が計画当初より廉価で購入可能であったため。

次年度使用額の使用計画

検討する数・種類を拡大して解析を行うため、試薬を増量して購入する予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Impaired induction of IL28B and expression of IFNλ4 associated with non-response to interferon-based therapy in chronic hepatitis C. (2015)
  • 著者名/発表者名: Murakawa M, Asahina Y, Nakagawa M, Sakamoto N, Nitta S, Kusano-Kitazume A, Watanabe T, Kawai-Kitahata F, Otani S, Taniguchi M, Goto F, Nishimura-Sakurai Y, Itsui Y, Azuma S, Kakinuma S, Watanabe M.
  • 雑誌名: J Gastroenterol Hepatol 巻: - ページ: -
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Serum granulysin levels as a predictor of serious telaprevir-induced dermatological reactions. (2015)
  • 著者名/発表者名: Suda G, Yamamoto Y, Nagasaka A, Furuya K, Kudo M, Yoshimichi C, Tsukuda Y, Tsunematsu S, Sato F, Terasita K, Nakai M, Horimoto H, Sho T, Natsuizka M, Ogawa K, Ohnishi S, Chuma M, Fujita Y, Abe R, Taniguchi M, Nakagawa M, Asahina Y, Sakamoto N.
  • 雑誌名: Hepatol Res 巻: - ページ: -
  • DOI: 10.1111/hepr.12421
  • 査読あり
• [雑誌論文] Hepatocellular carcinoma risk assessment using gadoxetic acid-enhanced hepatocyte phase magnetic resonance imaging. (2015)
  • 著者名/発表者名: Komatsu N, Motosugi U, Maekawa S, Shindo K, Sakamoto M, Sato M, Tatsumi A, Miura M, Amemiya F, Nakayama Y, Inoue T, Fukasawa M, Uetake T, Ohtaka M, Sato T, Asahina Y, Kurosaki M, Izumi N, Ichikawa T, Araki T, Enomoto N.
  • 雑誌名: Hepatol Res 巻: - ページ: -
  • DOI: 10.1111/hepr.12309
  • 査読あり
• [雑誌論文] Changes in plasma vascular endothelial growth factor at 8 weeks after sorafenib administration as predictors of survival for advanced hepatocellular carcinoma. (2014)
  • 著者名/発表者名: Tsuchiya K, Asahina Y, Matsuda S, Muraoak M, Nakata T, Suzuki Y, Tamaki N, Yasui Y, Suzuki S, Hosokawa T, Nishimura T, Ueda K, Kuzuya T, Nakanishi H, Itakura J, Takahashi Y, Kurosaki M, Enomoto N, Izumi N.
  • 雑誌名: Cancer 巻: 120 ページ: 229-273
  • DOI: 10.1002/cncr.28384
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Risk factors for exceeding the Milan criteria after successful radiofrequency ablation in patients with early stage hepatocellular carcinoma. (2014)
  • 著者名/発表者名: Tsuchiya K, Asahina Y, Tamaki N, Yasui Y, Hosokawa T, Ueda K, Nakanishi H, Itakura J, Kurosaki M, Enomoto N, Izumi N.
  • 雑誌名: Liver Transpl 巻: 20 ページ: 291-297
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Reduced organic anion transporter expression is a risk factor for hepatocellular carcinoma in chronic hepatitis C patients: A propensity score matching study. (2014)
  • 著者名/発表者名: Yasui Y, Kudo A, Kurosaki M, Matsuda S, Muraoka M, Tamak Ni, Suzuki S, Hosokawa T, Ueda K, Matsunaga K, Nakanishi H, Tsuchiya K, Itakura J, Takahashi Y, Tanaka S, Asahina Y, Enomoto N, Arii S, Izumi N.
  • 雑誌名: Oncology 巻: 86 ページ: 53-62
  • DOI: 10.1159/000356643
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] New Susceptibility and Resistance HLA-DP Alleles to HBV-Related Diseases Identified by a Trans-Ethnic Association Study in Asia. (2014)
  • 著者名/発表者名: Nishida N, Sawai H, Asahina Y, Mizokami M, et al.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 9 ページ: e86449
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0086449
  • 査読あり
• [雑誌論文] Impaired brain activity in cirrhotic patients with minimal hepatic encephalopathy: evaluation by near infrared spectroscopy. (2014)
  • 著者名/発表者名: Nakanishi H, Kurosaki M, Nakanishi K, Tsuchiya K, Noda T, Tamaki N, Yasui Y, Hosokawa T, Ueda K, Itakura J, Anami K, Asahina Y, Enomoto N, Higuchi T, Izumi N.
  • 雑誌名: Hepatol Res 巻: 44 ページ: 319-326
  • DOI: doi: 10.1111/hepr.12127
  • 査読あり
• [雑誌論文] Prospective comparison of real-time tissue elastography and serum fibrosis markers for the estimation of liver fibrosis in chronic hepatitis C patients. (2014)
  • 著者名/発表者名: Tamaki N, Kurosaki M, Matsuda S, Nakata T, Muraoka M, Suzuki Y, Yasui Y, Suzuki S, Hosokawa T, Nishimura T, Ueda K, Tsuchiya K, Nakanishi H, Itakura J, Takahashi Y, Matsunaga K, Taki K, Asahina Y, Izumi N.
  • 雑誌名: Hepatol Res 巻: 44 ページ: 720-727
  • DOI: 10.1111/hepr.12179
  • 査読あり
• [雑誌論文] JSH guidelines for the management of hepatitis B virus infection. (2014)
  • 著者名/発表者名: Asahina Y, HayashinN, Hiramatsu N, Izumi N, Koike K, Kumada H, Kurosaki M, Oketani M, Suzuki F, Takikawa H, Tanaka A, Tanaka E, Tanaka Y, Tsubouchi H, Yotsuyanagi H.
  • 雑誌名: Hepatol Res 巻: 44 ページ: 1-58
  • DOI: 10.1111/hepr.12269
  • 査読あり
• [雑誌論文] JSH guidelines for the management of hepatitis C virus infection: a 2014 update for genotype 1. (2014)
  • 著者名/発表者名: Asahina Y, HayashinN, Hiramatsu N, Izumi N, Koike K, Kumada H, Kurosaki M, Oketani M, Suzuki F, Takikawa H, Tanaka A, Tanaka E, Tanaka Y, Tsubouchi H, Yotsuyanagi H.
  • 雑誌名: Hepatol Res 巻: 44 ページ: 59-70
  • DOI: 10.1111/hepr.12272
  • 査読あり
• [学会発表] Gene Alterations in TERT promoter, CTNNB1, and TP53 are closely associated with development and prognosis of hepatocellular carcinoma: comprehensive analyses by next generation sequencing technology. (2015)
  • 著者名/発表者名: Asahina Y, Kawai-Kitahata F, Kaneko S, Nagata H, Goto F, Otani S, Taniguchi M, Murakawa M, Nitta S, Watanabe T, Tasaka-Fujita M, Itsui Y, Nakagawa M, Kakinuma S, Tanaka S, Tanabe M, Enomoto N, Watanabe M.
  • 学会等名: EASL The International Liver Congress 2015)
  • 発表場所: Vienna, Austria
  • 年月日: 2015-04-23
• [学会発表] Gene alterations in β-catenin and p53/ cell cycle control pathway are closely associated with development and prognosis of hepatocellular carcinoma: Comprehensive analyses by next generation sequencing technology. (2014)
  • 著者名/発表者名: Kawai-Kitahata F, Asahina Y, Kaneko S, Nagata H, Goto F, Otani S, Taniguchi M, Murakawa M, Nitta S, Watanabe T, Tasaka-Fujita M, Itsui Y, Nakagawa M, Kakinuma S, Enomoto N, Watanabe M.
  • 学会等名: The 65th Annual Meeting of the American Association for the Study of Liver Disease (AASLD The Liver Meeting 2014)
  • 発表場所: Boston, USA
  • 年月日: 2014-11-07 – 2014-11-11
• [学会発表] Matrix Metalloproteinase-14 regulates the maturation of fetal hepatic stem/progenitor cells in mice. (2014)
  • 著者名/発表者名: Otani S, Kakinuma S, Kamiya A, Goto F, Kaneko S, Azuma S, Asahina Y, Watanabe M.
  • 学会等名: The 65th Annual Meeting of the American Association for the Study of Liver Disease (AASLD The Liver Meeting 2014)
  • 発表場所: Boston, USA
  • 年月日: 2014-11-07 – 2014-11-11
• [学会発表] Impact of host and therapeutic factors and resistant associated variants on response to interferon based- direct acting antiviral treatment in difficult-to-treat chronic hepatitis C patients. (2014)
  • 著者名/発表者名: Nakagawa M, Asahina Y, Taniguchi M, Watanabe T, Nishimura-Sakurai Y, Itsui Y, Azuma S, Kakinuma S, Tanaka Y, Watanabe M.
  • 学会等名: The 65th Annual Meeting of the American Association for the Study of Liver Disease (AASLD The Liver Meeting 2014)
  • 発表場所: Boston, USA
  • 年月日: 2014-11-07 – 2014-11-11
• [学会発表] Expression of IFN/.4 in liver and PBMC is closely associated with higher basal expression of ISGs and impaired induction of IL28B by interferon treatment in chronic hepatitis C non-responder patients. (2014)
  • 著者名/発表者名: Murakawa M, Asahina Y, Nakagawa M, Sakamoto N, Nitta S, Kawai-Kitahata F, Taniguchi M, Watanabe T, Itsui Y, Kakinuma S, Watanabe M.
  • 学会等名: The 65th Annual Meeting of the American Association for the Study of Liver Disease (AASLD The Liver Meeting 2014)
  • 発表場所: Boston, USA
  • 年月日: 2014-11-07 – 2014-11-11
• [学会発表] Emergence or selection of resistant associated variant immediately after initiation of the therapy is predictive for failure of direct acting antiviral therapy: ultra-deep sequencing analyses for serial time points. (2014)
  • 著者名/発表者名: Watanabe T, Asahina Y, Nakagawa M, Kakinuma S, YItsui Y, Taniguchi T, Murakawa M, Nagata H, Miura M, Maekawa S, Enomoto E, Watanabe M.
  • 学会等名: The 65th Annual Meeting of the American Association for the Study of Liver Disease (AASLD The Liver Meeting 2014)
  • 発表場所: Boston, USA
  • 年月日: 2014-11-07 – 2014-11-11
• [学会発表] Clinical outcomes in patients who develop hepatocellular carcinoma after hepatitis C viral eradication by antiviral therapy. (2014)
  • 著者名/発表者名: Tsuchiya K, Yasui Y, Tamaki N, Suzuki S, Hosokawa T, Nakanishi H, Itakura J, Takahashi Y, Kurosaki M, Asahina Y, Izumi N.
  • 学会等名: The 65th Annual Meeting of the American Association for the Study of Liver Disease (AASLD The Liver Meeting 2014)
  • 発表場所: Boston, USA
  • 年月日: 2014-11-07 – 2014-11-11
• [学会発表] Associations of HLA-DPB1 with CHB infection and HBV related HCC in Asia. (2014)
  • 著者名/発表者名: Nishida N, Sawai H, Asahina Y, Mizokami M, et al.
  • 学会等名: The 65th Annual Meeting of the American Association for the Study of Liver Disease (AASLD The Liver Meeting 2014)
  • 発表場所: Boston, USA
  • 年月日: 2014-11-07 – 2014-11-11
• [学会発表] Impaired IL28B gene induction and expression of IFNλ4 influenced by the polymorphisms near IL28B gene are closely associated with a non-response to interferon in chronic hepatitis C patients. (2014)
  • 著者名/発表者名: Asahina Y, Murakawa M, NittaS, Itsui Y, Nakagawa M, Azuma S, Kakinuma S, Watanabe M.
  • 学会等名: The 49th annual meeting of the European association for the study of the liver (EASL The International Liver Congress 2014)
  • 発表場所: London, UK
  • 年月日: 2014-04-08 – 2014-04-14
• [学会発表] Gadolinium ethoxybenzyl diethylenetriaminepentaacetic acid magnetic resonance imaging and contrast enhanced ultrasonography with sonazoid as part of therapeutic strategies for small nonhypervascular hepatic nodular lesions. (2014)
  • 著者名/発表者名: Tsuchiya K, Yasui Y, Takada N, Nakakuki S, Matsuda S, Kaneko S, Muraoka M, Yamashita N, Hattori N, Tamaki N, Osaki S, Suzuki T, Hosokawa K, Ueda K, Nakanishi H, Itakura J, Takahashi Y, Kurosaki M, Asahina Y, Izumi N.
  • 学会等名: The 49th annual meeting of the European association for the study of the liver (EASL The International Liver Congress 2014)
  • 発表場所: London, UK
  • 年月日: 2014-04-08 – 2014-04-14