研究課題
腸管病理組織の解析を,野生マウス(WT),Nrf2-遺伝子欠失マウス(Nrf2-KO),p62-遺伝子欠失マウス(p62-KO),p62:Nrf2 遺伝子二重欠失マウス(p62:Nrf2-DKO)の4系統のマウスについて行った.Nrf2-KOとp62:Nrf2-DKOには,空腸および回腸上皮には,上皮の低層化,障害(脱落や潰瘍形成)と炎症細胞浸潤が惹起されることが判明した.p62:Nrf2-DKOにおける変化が顕著であった.p62:Nrf2-DKOでは他のマウスに比してS/Mが有意に高値であることより,その腸管バリアー機能が低下し,その粘膜透過性が亢進している可能性が示された.また,内臓脂肪組織の解析を,WTとp62:Nrf2-DKOについて行ったところ,p62:Nrf2-DKOの内臓脂肪組織には強い炎症細胞浸潤が認められた.さらに,p62:Nrf2-DKOにおける肝における自然免疫系の活性化について解析したところ,肥満や肝病変が出現する前の時期に,toll-like受容体(TLRs)および炎症性サイトカインの発現レベルが他のマウスに比して約2-3倍と高値であった.このことより,p62:Nrf2-DKOでは腸管バリアー機能の低下に関連して,腸内細菌由来LPSによる肝の自然免疫系の活性亢進が生じていると考えられた.本マウスにおける高レプチン血症(図4)もtoll-like受容体のアダプター分子であるCD14の発現を増加させることにより,自然免疫系の活性亢進に寄与していると推測された.
2: おおむね順調に進展している
進捗結果として,p62:Nrf2-DKO におけるNASHの病態では,腸管バリアー機能の低下はLPSの血中濃度を上昇させ,マクロファージやクッパー細胞における自然免疫活性亢進を誘発し,肝障害の進展に重要な因子であるとの重要所見が得られた.
今年度は,p62:Nrf2-DKO におけるマクロファージやクッパー細胞に関する機能解析を実施する.小動物撮影用MRIを用いてSPIO-MRI撮影を施行する.投与前と投与15分後のT2 強調画像を撮影し,肝右葉の15分間のシグナル強度の変化(造影後/造影前シグナル)(RSE)を評価する.マクロファージやクッパー細胞の細胞数と貪食機能の解析として,各種マウスの総頸静脈から蛍光ビーズを注入し,1時間後に肝標本において,これら細胞が貪食した蛍光ビーズの数をカウントする.
次年度に実験を予定していたこと(物品費購入)、複数の学会参加を予定していたため。
物品費購入638,000円、旅費200,000円
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すべて 雑誌論文 (61件) (うち査読あり 61件、 オープンアクセス 61件、 謝辞記載あり 61件) 学会発表 (24件) 図書 (11件)
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