遺伝子不安定性の異なるサブクラス分類に有用な新規マウス大腸癌疾患モデルの確立

2016 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 25293284
• 研究機関: 独立行政法人国立病院機構(呉医療センター臨床研究部)
• 研究代表者: 檜井 孝夫 独立行政法人国立病院機構(呉医療センター臨床研究部), その他部局等, その他 (10444689)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: 大腸癌 / マウスモデル / Kras / TGFbeta

研究実績の概要

本研究では私共がこれまでに確立した自然発生による左側大腸癌（CIN型）モデルや右側大腸癌（MSI型）モデルを応用して、これらのモデルでノックアウトされているApcに加え、Kras, TGFβIIR，Ptenなどの別の大腸癌発癌ドライバー遺伝子を1つ追加してノックアウトした複合的遺伝子改変マウスを作製した。同時に新規大腸上皮特異的Cre発現誘導マウス（CDX2P-Cre-ER）を作製し、左側大腸型でホモのダブルノックアウトマウスを作製した。これらのマウスにおいて病態の経過観察後、腫瘍細胞（原発巣、転移巣）を回収した。マイクロアレイ法を用い、腫瘍間の遺伝子発現プロファイルを比較、転写産物の発現変化を示した遺伝子をバイオマーカー候補遺伝子として絞り込んだ。
変異型Krasに関しては、Kras変異型マウスとKras野生型マウスを作製し比較した。Kras変異型腫瘍でGlut1転写産物とタンパク発現が増加しており、大腸癌細胞株やヒト大腸癌の免疫染色でGLUT1の発現がKRAS変異と有意に相関した。逆に、変異型Krasmマウスの腫瘍では、Rcan2（regulator calcineurin 2）が発現抑制されており、RCAN2は、腫瘍先進部での細胞増殖抑制に関与する癌抑制遺伝子として機能している可能性が示唆された。またRCAN2ならびにそれが制御するCalcineurin-NFAT経路はKRAS変異型大腸癌の新規分子治療の標的となりうることが示唆された。
TGFbRII欠損モデルでは、GsdmcがTgfbr2変異に伴い発現亢進していた。またGSDMCは大腸癌の発癌過程で発現し、細胞増殖を亢進している癌関連遺伝子であることが示唆され、GSDMCは、TGFBR2変異大腸癌の新規分子治療の標的となりうることが示唆された。

現在までの達成度 (段落)

28年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

28年度が最終年度であるため、記入しない。

次年度使用額が生じた理由

28年度が最終年度であるため、記入しない。

次年度使用額の使用計画

28年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] Choline Deficiency Causes Colonic Type II Natural Killer T (NKT) Cell Loss and Alleviates Murine Colitis under Type I NKT Cell Deficiency. (2017)
  • 著者名/発表者名: Sagami S, Ueno Y, Tanaka S, Fujita A, Niitsu H, Hayashi R, Hyogo H, Hinoi T, Kitadai Y, Chayama K.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 12 ページ: e0169681
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] KIF11 Is Required for Spheroid Formation by Oesophageal and Colorectal Cancer Cells. (2017)
  • 著者名/発表者名: Imai T, Oue N, Sentani K, Sakamoto N, Uraoka N, Egi H, Hinoi T, Ohdan H, Yoshida K, Yasui W.
  • 雑誌名: Anticancer Res. 巻: 37 ページ: 47-55
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Gasdermin C Is Upregulated by Inactivation of Transforming Growth Factor β Receptor Type II in the Presence of Mutated Apc, Promoting Colorectal Cancer Proliferation. (2016)
  • 著者名/発表者名: Miguchi M, Hinoi T, Shimomura M, Adachi T, Saito Y, Niitsu H, Kochi M, Sada H, Sotomaru Y, Ikenoue T, Shigeyasu K, Tanakaya K, Kitadai Y, Sentani K, Oue N, Yasui W, Ohdan H.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 11 ページ: e0166422
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] KRAS mutation leads to decreased expression of regulator of calcineurin 2, resulting in tumor proliferation in colorectal cancer. (2016)
  • 著者名/発表者名: Niitsu H, Hinoi T, Kawaguchi Y, Sentani K, Yuge R, Kitadai Y, Sotomaru Y, Adachi T, Saito Y, Miguchi M, Kochi M, Sada H, Shimomura M, Oue N, Yasui W, Ohdan H.
  • 雑誌名: Oncogenesis. 巻: 5 ページ: 8
  • DOI: 10.1038/oncsis.2016.47
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Increased Calcineurin A Expression Is Associated with a Lower Relapse-Free Survival Rate after Colorectal Cancer Surgery. (2016)
  • 著者名/発表者名: Niitsu H, Hinoi T, Sentani K, Mukai S, Adachi T, Saito Y, Miguchi M, Kochi M, Sada H, Oue N, Yasui W, Ohdan H.
  • 雑誌名: Pathobiology 巻: 83 ページ: 308-15
  • DOI: 10.1159/000445121.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Regulation of multidrug resistance 1 expression by CDX2 in ovarian mucinous adenocarcinoma. (2016)
  • 著者名/発表者名: Koh I, Hinoi T, Sentani K, Hirata E, Nosaka S, Niitsu H, Miguchi M, Adachi T, Yasui W, Ohdan H, Kudo Y.
  • 雑誌名: Cancer Med 巻: 5 ページ: 1546-55
  • DOI: 10.1002/cam4.697
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mouse model of proximal colon-specific tumorigenesis driven by microsatellite instability-induced Cre-mediated inactivation of Apc and activation of Kras. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kawaguchi Y, Hinoi T, Saito Y, Adachi T, Miguchi M, Niitsu H, Sasada T, Shimomura M, Egi H, Oka S, Tanaka S, Chayama K, Sentani K, Oue N, Yasui W, Ohdan H.
  • 雑誌名: J Gastroenterol 巻: 51 ページ: 447-57
  • DOI: 10.1007/s00535-015-1121-9
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [学会発表] CDX2P-CreERT2:Apcflox/flox;KrasG12D マウスモデルを用いたタモキシフェン投与量依存性腫瘍発育速度の検討 (2016)
  • 著者名/発表者名: 佐田春樹、檜井孝夫
  • 学会等名: 第75回日本癌学会
  • 発表場所: 横浜、日本
  • 年月日: 2016-10-06 – 2016-10-08
• [学会発表] CDX2P-CreERT2:Apcflox/flox;KrasG12D マウスモデルを用いた大腸癌発生速度の検討 (2016)
  • 著者名/発表者名: 河内雅年, 檜井孝夫, 安達智洋, 斎藤保文, 三口真司, 新津宏明, 佐田春樹, 坂本直也, 仙谷和弘, 大上直秀, 安井弥, 大段秀樹
  • 学会等名: 第27回日本消化器癌発生学会
  • 発表場所: 鹿児島
  • 年月日: 2016-09-15 – 2016-09-16
• [学会発表] Establishment of novel conditional Apc-knockout colorectal cancer mouse models with distinct genomic stability and its application to clinical diagnosis and therapy. (2016)
  • 著者名/発表者名: Takao HINOI, Eric R. FEARON, Wataru YASUI, Hideki OHDAN
  • 学会等名: K-INT
  • 発表場所: Kure, Japan
  • 年月日: 2016-07-21 – 2016-07-24
  • 国際学会 / 招待講演