| 研究課題/領域番号 |
25293347
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
岩崎 真一 東京大学, 医学部附属病院, 准教授 (10359606)
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| 研究分担者 |
吉川 弥生 東京大学, 医学部附属病院, 病院診療医 (00452350)
樫尾 明憲 東京大学, 医学部附属病院, 助教 (20451809)
中島 敏明 獨協医科大学, 医学部, 教授 (50227790)
藤本 千里 東京大学, 医学部附属病院, 助教 (60581882)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2017-03-31
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| キーワード | 内耳 / 有毛細胞 / オートファジー / プロテアソーム |
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| 研究実績の概要 |
細胞の品質管理において重要な役割を果たすタンパク質分解系が、内耳障害の際に果たす役割について、細胞レベルで明らかにすることを目的として、主たるタンパク質分解系である、ユビキチン・プロテアソーム系とオートファジー・リソソーム系の双方に関して解析を行った。
１．オートファジー・リソソーム系に関しては、Pouf3-CreトランスジェニックマウスとAtg5 floxマウスを交配することによって、内耳有毛細胞特異的にオートファジーがノックアウトされたマウスを作製し、その内耳機能についての解析を行った。このマウスでは、聴性脳幹反応（ABR)による聴力測定では、生後14日目以降では高度難聴を呈した。
内耳の組織学的検査では、生後5日目ではほご正常状態であったが、生後１4日目になると、内有毛細胞、外有毛細胞ともに、聴毛の損傷を認め、生後28日目になるとほとんどの有毛細胞が消失していた。ワイルドタイプのマウスにおいては、聴力は正常で、有毛細胞の消失も認めなかった。
生後5日目の内耳有毛細胞特異的Atg5ノックアウトマウスにおいては、有毛細胞無いに異常なタンパクの凝集体を多数認めた。これらの凝集体はユビキチンとp62ともに陽性であった。同時期の有毛細胞の機能について、FM1-43で計測したところ、正常であることを確認した。
２．ユビキチン・プロテアソーム系に関しては、蝸牛由来おcell lineであるHEI-OC1を用いて、H2O2による細胞障害二対して、プロテアソーム阻害剤ではるMG-132とborzotemibの保護効果について、検討を行った。MG-132およびborzotemibはともに、濃度依存的にプロテアソーム活性を抑制した。細胞増殖アッセイでは、いずれの薬剤においても低濃度では細胞保護機能を認め、高濃度では細胞障害を引き起こした。
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| 現在までの達成度 (段落) |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
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| 今後の研究の推進方策 |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
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| 次年度使用額の使用計画 |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
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