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2013 年度 実施状況報告書

完全弾性体を目指したDNAナノゲル薄膜の構築とその評価

研究課題

研究課題/領域番号 25410173
研究種目

基盤研究(C)

研究機関山形大学

研究代表者

古澤 宏幸  山形大学, 理工学研究科, 准教授 (60345395)

研究期間 (年度) 2013-04-01 – 2016-03-31
キーワード水晶発振子 / アドミッタンス解析 / エネルギー散逸値 / 動的粘弾性測定 / 貯蔵弾性率 / 損失弾性率 / ポリジメチルシロキサン
研究概要

本研究では、精密な構造を形成可能な生体高分子であるDNAを利用して完全均一性構造体のゲル薄膜をずり振動を生じる水晶発振子基板上に構築し、様々な周波数で振動させることで動的粘弾性測定を行い、従来の不均一構造体のゲルでは見られないような特異な力学物性を示すかどうかを明らかにすることを目的とする。
本年度は、水晶薄片の両面に金電極を蒸着し交流電圧を印加することにより水晶板を規則正しく振動させた水晶発振子に、ネットワークアナライザーを接続してアドミッタンス解析を行うことで振動のエネルギー散逸値を求め、そこから動的粘弾性のパラメータである貯蔵弾性率および損失弾性率を求める方法論の妥当性の検証を検討した。
測定サンプルとして、既存の合成高分子であるポリスチレン(PS)やポリジメチルシロキサン(PDMS)を水晶発振子基板上にキャストし動的粘弾性測定を行ったところ、ポリスチレン薄膜はほぼ完全な弾性体の性質を示し、ポリジメチルシロキサンの薄膜は架橋剤の増加に従って貯蔵弾性率が増加し、文献値に近い値を示した。その他には、親水性ゲルとしてよく用いられているアクリルアミドゲルやアガロースゲルの薄膜も同様に測定を実施した。
以上の結果より、水晶発振子がずり振動をプローブとしてその基板上に固定された数百nmの薄膜の物性を、振動伝播の様子からずり弾性率を求めることが可能であることが確認でき、本手法によりごく少量しか入手できないような生体分子などの弾性率を求めることができるようになることが期待できる。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

非常に薄いDNAのナノゲル薄膜の力学物性を測定できる装置として水晶発振子を利用できることを、既存のマテリアルであるポリスチレンやポリジメチルシロキサンをサンプルとして用いることで確認できた。

今後の研究の推進方策

水晶発振子基板上に4分岐型DNAを用いて四面体ネットワーク形成によりダイヤモンド構造様の構造体を有するDNAナノゲル薄膜を調製する。DNAの配列設計において、最適なDNAののりしろの長さや配列、アームの長さを検討し、DNAネットワークの多層構造体が基板上で構築されるかについて確認実験を行う。

次年度の研究費の使用計画

年度末に購入予定の物品等が納期の都合上、次年度になったため。
次年度も使用するルーチンの物品等のため、当初の使用計画の変更等はない。

  • 研究成果

    (9件)

すべて 2013 その他

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件) 学会発表 (6件) (うち招待講演 2件)

  • [雑誌論文] Mechanism of Thiol-Disulfide Exchange Reactions between DsbA and DsbB over a Wide pH Range2013

    • 著者名/発表者名
      K. Yazawa, H. Furusawa, and Y. Okahata
    • 雑誌名

      Chem. Lett.

      巻: 42 ページ: 241-243

    • DOI

      10.1246/cl.2013.241

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Translation Enhancer Improves the Ribosome Liberation from Translation Initiation2013

    • 著者名/発表者名
      S. Takahashi, H. Furusawa, T. Ueda, and Y. Okahata
    • 雑誌名

      J. Am. Chem. Soc.

      巻: 135 ページ: 13096-13106

    • DOI

      10.1021/ja405967h

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Real-time Monitoring of Intermediates Reveals the Reaction Pathway in the Thiol-Disulfide Exchange between Disulfide Bond Formation Protein A (DsbA) and B (DsbB) on a Membrane-immobilized Quartz Crystal Microbalance (QCM) System2013

    • 著者名/発表者名
      K. Yazawa, H. Furusawa, and Y. Okahata
    • 雑誌名

      J. Biol. Chem.

      巻: 288 ページ: 35969-35981

    • DOI

      10.1074/jbc.M113.519876

    • 査読あり
  • [学会発表] 全反射蛍光顕微鏡を用いたDNA支持型脂質膜上での膜タンパク質の動的挙動解析

    • 著者名/発表者名
      古澤 宏幸、辻 健太郎、岡畑 惠雄
    • 学会等名
      第23回バイオ高分子シンポジウム
    • 発表場所
      東京工業大学
  • [学会発表] 水晶発振子アドミッタンス法を用いるRNA鎖の動的構造変化の追跡

    • 著者名/発表者名
      古澤 宏幸、春原 有美子、吉田 亜矢、岡畑 惠雄
    • 学会等名
      第62回高分子討論会
    • 発表場所
      金沢大学
  • [学会発表] 水晶発振子アドミッタンス法を用いるHfqのRNAシャペロン活性の動的解析

    • 著者名/発表者名
      古澤 宏幸、吉田 亜矢、岡畑 惠雄
    • 学会等名
      第7回バイオ関連化学シンポジウム
    • 発表場所
      名古屋大学
  • [学会発表] 生体分子と高分子の粘弾性を測る

    • 著者名/発表者名
      古澤 宏幸
    • 学会等名
      関東高分子若手研究会2013秋の講演会
    • 発表場所
      東京工業大学
    • 招待講演
  • [学会発表] 水晶発振子で生体分子の構造変化をみる

    • 著者名/発表者名
      古澤 宏幸
    • 学会等名
      平成25年度東北地区先端高分子セミナー
    • 発表場所
      仙台秋保温泉
    • 招待講演
  • [学会発表] 全反射蛍光顕微鏡を用いたDNA二重鎖形成の一分子観察(1)

    • 著者名/発表者名
      古澤 宏幸、矢澤 健二郎、岡畑 惠雄
    • 学会等名
      日本化学会第94春季年会
    • 発表場所
      名古屋大学

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公開日: 2015-05-28  

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