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2014 年度 実施状況報告書

バイラメラ空間内脱水酵素反応を利用した炭酸カルシウム中空ナノ粒子の気泡塔合成

研究課題

研究課題/領域番号 25420833
研究機関山口大学

研究代表者

吉本 誠  山口大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (80322246)

研究期間 (年度) 2013-04-01 – 2016-03-31
キーワード生体材料 / ナノ材料 / バイオリアクター / 酵素反応 / 生物・生体工学
研究実績の概要

負に帯電させたリポソーム(脂質二分子膜小胞)の表面に,二酸化炭素から炭酸イオンの生成反応を触媒する炭酸脱水酵素を共有結合で固定化し,さらにカルシウムイオンを静電的に結合させた。リポソーム膜に固定化された炭酸脱水酵素は活性を維持していることを確認した。さらに,リポソーム懸濁液中におけるカルシウムイオン濃度を制御することにより,リポソーム同士を安定に分散させた状態でリポソーム表面にカルシウムイオンを吸着させた。カルシウムの吸着はゼータ電位測定で明らかにした。このリポソームを,双性脂質からなるリポソーム膜で包括することにより,バイラメラ構造をもち,内部に炭酸脱水酵素とカルシウムを固定化させたリポソームを調製した。液本体中のカルシウムイオンは,透析法によりバイラメラリポソームから分離除去した。この触媒系を懸濁した溶液と,二酸化炭素飽和溶液を混合して,バイラメラリポソーム系において炭酸カルシウムの生成を誘導した。炭酸カルシウム中空粒子が生成した可能性について,動的光散乱法による粒子径測定や脂質膜透過性の変化等により評価を試みた。以上のように,バイラメラリポソームの特異的な構造を利用して酵素反応と無機微粒子生成反応へ応用するための触媒系を構築できた。この触媒系は,試験管内等の静止液系に加えて,二酸化炭素ガスを通気したエアリフト型気泡塔等の実用的な反応器でも安定な触媒として機能することが期待できる。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

リポソームへの酵素およびカルシウムの固定化,遊離酵素・カルシウムの分離及びバイラメラ構造の形成の多段階の操作を必要とする触媒系の構築ができた。この触媒系の構築は,本研究の目的である中空微粒子生成反応において最も重要な点であることから,順調に進展しているとした。

今後の研究の推進方策

リポソーム表層およびバイラメラ間における炭酸カルシウム層の生成反応を粒子径の変化と合わせてリポソーム膜の強度変化等の機能的な観点から評価する。生成粒子の中空構造についても評価する。さらに,外部循環式エアリフト型気泡塔等を用いて,反応器内の流動特性が触媒機能に及ぼす効果について検討する。

  • 研究成果

    (10件)

すべて 2015 2014

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件、 謝辞記載あり 3件) 学会発表 (7件)

  • [雑誌論文] Liposomes as chaperone mimics with controllable affinity toward heat-denatured formate dehydrogenase from Candida boidinii2015

    • 著者名/発表者名
      Makoto Yoshimoto, Ryohei Kozono and Naoki Tsubomura
    • 雑誌名

      Langmuir

      巻: 31 ページ: 762-770

    • DOI

      10.1021/la504126b

    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Selective oxidation of D-amino acids catalyzed by oligolamellar liposomes intercalated with D-amino acid oxidase2014

    • 著者名/発表者名
      Makoto Yoshimoto, Masakazu Okamoto, Kouta Ujihashi and Takayuki Okita
    • 雑誌名

      Langmuir

      巻: 30 ページ: 6180-6186

    • DOI

      10.1021/la500786m

    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] A kinetic analysis of catalytic production of oxygen in catalase-containing liposome dispersions for controlled transfer of oxygen in a bioreactor.2014

    • 著者名/発表者名
      Makoto Yoshimoto and Minato Higa
    • 雑誌名

      J. Chem. Technol. Biotechnol.

      巻: 89 ページ: 1388-1395

    • DOI

      10.1002/jctb.4216

    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [学会発表] セルラーゼ封入リポソームを用いたイオン液体共存下における不溶性セルロース糖化反応2014

    • 著者名/発表者名
      三穂野海,大津豪志,吉本誠,上村明男
    • 学会等名
      化学工学会中国四国支部大学院生発表会
    • 発表場所
      RCC文化センター(広島市)
    • 年月日
      2014-12-05 – 2014-12-05
  • [学会発表] 脂質膜の透過選択性と酵素安定化機能を利用するリポソーム系D-アミノ酸酸化反応2014

    • 著者名/発表者名
      吉本誠,岡本真和,宇治橋康太,沖田敬之
    • 学会等名
      膜シンポジウム2014
    • 発表場所
      神戸大学(神戸市)
    • 年月日
      2014-11-26 – 2014-11-27
  • [学会発表] Clusters of phospholipid vesicles as platforms for glucose oxidase-catalyzed reaction in a bubble column bioreactor2014

    • 著者名/発表者名
      Makoto Yoshimoto, Yuki Sakakida, Ryota Tamura, Tomotaka Natsume and Tomoaki Ikeda
    • 学会等名
      2nd Int. Symp. Multiscale Multiphase Process Eng. (MMPE)
    • 発表場所
      Hamburg (Germany)
    • 年月日
      2014-09-24 – 2014-09-27
  • [学会発表] Estimation of the shear rate in airlift and normal bubble columns on the basis of shear-dependent permeability of liposome membranes2014

    • 著者名/発表者名
      Tomotaka Natsume, Makoto Yoshimoto and Katsumi Nakao
    • 学会等名
      2nd Int. Symp. Multiscale Multiphase Process Eng. (MMPE)
    • 発表場所
      Hamburg (Germany)
    • 年月日
      2014-09-24 – 2014-09-27
  • [学会発表] リポソームを用いる気泡塔内せん断速度に及ぼす装置形状と液深の影響の評価2014

    • 著者名/発表者名
      夏目友誉,吉本誠,中尾勝實
    • 学会等名
      化学工学会第46回秋季大会
    • 発表場所
      九州大学(福岡市)
    • 年月日
      2014-09-17 – 2014-09-19
  • [学会発表] 気液流動で分散性が変化するクラスター化リポソームを利用したグルコース酸化反応操作2014

    • 著者名/発表者名
      榊田祐希,吉本誠
    • 学会等名
      化学工学会第46回秋季大会
    • 発表場所
      九州大学(福岡市)
    • 年月日
      2014-09-17 – 2014-09-19
  • [学会発表] 蟻酸脱水素酵素の熱安定性に及ぼす共存脂質二分子膜の疎水鎖特性と電荷の影響2014

    • 著者名/発表者名
      小園遼平,吉本誠
    • 学会等名
      化学工学会第46回秋季大会
    • 発表場所
      九州大学(福岡市)
    • 年月日
      2014-09-17 – 2014-09-19

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公開日: 2016-05-27  

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