可変型遺伝子トラップマウスにおいて発現に性差を示す遺伝子の機能解析

2016 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 25430092
• 研究機関: 熊本大学
• 研究代表者: 吉信 公美子 熊本大学, 生命資源研究・支援センター, 助教 (20274730)
• 研究分担者: 荒木 正健 熊本大学, 生命資源研究・支援センター, 准教授 (80271609)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: 性差発現 / Elovl6 / 遺伝子トラップ / 表現型解析

研究実績の概要

我々は、可変型遺伝子トラップマウスの解析を進める中、成体臓器において発現に性差を示すラインを見出した。本研究テーマでは、遺伝子トラップマウスを利用して性差発現を示す遺伝子の機能解析を行い、性差の背景を明らかにすることを目指した。
1. 候補遺伝子Elovl6, β4galt5, 6720401G13Rik(Firre),Smyd2,Tcf12について、C57BL/6N(B6)系統の雌雄各３匹のcDNAを用いてRT-PCRを行った。顕著な性差は認められなかったが、Smyd2は脳と心臓で、Tcf12は小腸で、雄が雌よりも発現量が若干多い傾向が見られ、X-gal染色結果と相関していた。
2.表現型解析の対象であったSmyd2トラップラインでX-gal染色の再検証を行ったが、当初得られた性差は認められなかった。そこでH27年度にElovl6トラップクローンを凍結胚から起こしラインを樹立した。Elovl6は、ラット肝臓において既にRNAレベルおよびタンパクレベルで性差発現が報告されている。しかしながら、マウスでも性差発現を明らかにし、表現型との関連を示すことが重要と考え、研究を進めた。
3.B6系統の雌雄各６匹のcDNAを新たに合成し、定量PCRによりElovl6発現を解析したが、肝臓において性差はみられなかった。Elovl6トラップ（Elovl6ノックアウト）ラインのヘテロ接合体交配では、ホモ接合体はメンデルの法則に沿って生まれたが、野生型やヘテロ接合体に比べ体重が軽かった。体重差は雌よりも雄が大きく、雄のほうがElovl6ノックアウトの影響が大きいことが示唆された。
本研究期間では、性差発現と表現型を結びつけるまでには至らなかった。その要因として解析週齢、性周期、マウス系統種差が複雑に関与している可能性が示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Endothelial CD99 supports arrest of mouse neutrophils in venules and binds to neutrophil PILRs. (2017)
  • 著者名/発表者名: Goswami, D., Marz, S., Li, Y. T., Artz, A., Schafer, K., Seelige, R., Pacheco-Blanco, M., Jing, D., Bixel, M. G., Araki, M., Araki, K., Yamamura, K., Vestweber, D.
  • 雑誌名: Blood in press 巻: - ページ: -
  • DOI: -
• [雑誌論文] Development of an efficient screening system to identify novel bone metabolism-related genes using the exchangeable gene trap mutagenesis mouse models. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kurogi S, Sekimoto T, Funamoto T, Ota T, Nakamura S, Nagai T, Nakahara M, Yoshinobu K, Araki K, Araki M, Chosa E.
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 7 ページ: -
  • DOI: 10.1038
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] The importance of basonuclin 2 in adult mice and its relation to basonuclin 1. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kacso, G., Ravasz, D., Doczi, J., Nemeth, B., Madgar, O., Saada, A., Ilin, P., Miller, C., Ostergaard, E., Iordanov, I., Adams, D., Vargedo, Z., Araki, M., Araki, K., Nakahara, M., Ito, H., Gal, A., Molnar, M., Nagy, Z., Patocs, A., Adam-Vizi, V. and Chinopoulos, C.
  • 雑誌名: Biochemical Journal 巻: 473(20) ページ: 3463-3485
  • DOI: 10.1016
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] MiR-142 is required for Staphylococcus aureus clearance at skin wound sites via small GTPase-mediated regulation of the neutrophil actin cytoskeleton. (2016)
  • 著者名/発表者名: Tanaka, K., Kim, S. E., Yano, H., Matsumoto, G., Ohuchida, R., Ishikura, Y., Araki, M., Araki, K., Park, S., Komatsu, T., Hayashi, H., Ikematsu, K., Tanaka, K., Hirano, A., Martin, P., Shimokawa, I., Mori, R.
  • 雑誌名: Journal of Investigative Dermatology 巻: 137 ページ: 931-940
  • DOI: 10.1016
  • 査読あり / 国際共著
• [学会発表] 遺伝子トラップはlincRNA遺伝子の破壊と機能解析に有用である (2017)
  • 著者名/発表者名: 中原舞,吉信公美子,古畑理樹,杉本道彦,山村研一,荒木正健,荒木喜美
  • 学会等名: 平成28年度先端モデル動物支援プラットフォーム成果発表会
  • 発表場所: 滋賀（琵琶湖ホテル）
  • 年月日: 2017-02-06 – 2017-02-07
• [学会発表] Gene-trap mutagenesis is useful for analysis of long intergenic non-coding RNA genes in vivo. (2016)
  • 著者名/発表者名: Nakahara, M., Yoshinobu, K., Furuhata, R., Kido, Y., Sugimoto, M., Yamamura, K., Araki, M., Araki, K.
  • 学会等名: 第39回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
  • 年月日: 2016-11-30 – 2016-12-02
• [学会発表] 可変型遺伝子トラップ法で作製したTmem161a欠損マウスは明らかな骨量増加を呈する (2016)
  • 著者名/発表者名: 永井琢哉、関本朝久、舩元太郎、黒木修司、大田智美、中村志保子、中原舞、吉信公美子、荒木喜美、荒木正健、帖佐悦男
  • 学会等名: 第31回日本整形外科学会基礎学術集会
  • 発表場所: 福岡国際センター
  • 年月日: 2016-10-13 – 2016-10-14
• [学会発表] 可変型遺伝子トラップ法で作製したLima1/EPLIN欠損マウスは骨芽細胞間接着異常を認め骨量減少を呈する (2016)
  • 著者名/発表者名: 中村志保子、関本朝久、黒木修司、舩元太郎、大田智美、永井琢哉、中原舞、吉信公美子、荒木喜美、荒木正健、帖佐悦男
  • 学会等名: 第31回日本整形外科学会基礎学術集会
  • 発表場所: 福岡国際センター
  • 年月日: 2016-10-13 – 2016-10-14
• [学会発表] 可変型遺伝子トラップ法を用いたlamin B receptor変異マウスは成長障害をきたす (2016)
  • 著者名/発表者名: 舩元太郎、関本朝久、黒木修司、大田智美、中村志保子、中原舞、吉信公美子、荒木喜美、荒木正健、帖佐悦男
  • 学会等名: 第31回日本整形外科学会基礎学術集会
  • 発表場所: 福岡国際センター
  • 年月日: 2016-10-13 – 2016-10-14
• [学会発表] 可変型遺伝子トラップ法を用いた骨軟骨異常を来す新規遺伝子改変マウスライブラリー構築 (2016)
  • 著者名/発表者名: 黒木修司、関本朝久、舩元太郎、大田智美、中村志保子、永井琢哉、中原舞、吉信公美子、荒木喜美、荒木正健、帖佐悦男
  • 学会等名: 第31回日本整形外科学会基礎学術集会
  • 発表場所: 福岡国際センター
  • 年月日: 2016-10-13 – 2016-10-14
• [学会発表] 染色体特異的にクラスターを形成しているトラップ領域（CSCT13）の解析 (2016)
  • 著者名/発表者名: 荒木正健、武田伊世、大賀敏範、江藤聡、中原舞、吉信公美子、荒木喜美
  • 学会等名: 日本遺伝学会第88回大会
  • 発表場所: 三島
  • 年月日: 2016-09-07 – 2016-09-10
• [学会発表] Cre-driverマウスラインの樹立と解析 (2016)
  • 著者名/発表者名: 國場訓、江藤聡、荒木美幸、森田彩香、來海葉子、山村研一、 吉信公美子、荒木喜美、荒木正健
  • 学会等名: 日本遺伝学会第88回大会
  • 発表場所: 三島
  • 年月日: 2016-09-07 – 2016-09-10
• [学会発表] CSCT2領域(3.1Mbp)欠損マウスラインの樹立 (2016)
  • 著者名/発表者名: 大賀俊範、武田伊世、江藤聡、中原舞、吉信公美子、荒木喜美、荒木正健
  • 学会等名: 日本遺伝学会第88回大会
  • 発表場所: 三島
  • 年月日: 2016-09-07 – 2016-09-10
• [学会発表] ゲノム編集によるlincRNAトラップクローンの修正と解析 (2016)
  • 著者名/発表者名: 吉信公美子、吉住友希、林田隆成、中原舞、荒木正健、荒木喜美
  • 学会等名: 日本ゲノム編集学会
  • 発表場所: 広島国際会議場
  • 年月日: 2016-09-06 – 2016-09-07
• [学会発表] Gene-trap mutagenesis is useful for analysis of long intergenic non-coding RNA genes in vivo. (2016)
  • 著者名/発表者名: Nakahara, M., Yoshinobu, K., Ito, H., Furuhata, R., Yamamura, K., Araki, M., Araki, K.
  • 学会等名: The 2016 AMMRA & AMPC meeting
  • 発表場所: 箱根
  • 年月日: 2016-05-20 – 2016-05-21
  • 国際学会
• [学会発表] 可変型遺伝子トラップ法を用いた骨軟骨疾患に関与する新規遺伝子群のライブラリー構築 (2016)
  • 著者名/発表者名: 関本朝久、舩元太郎、黒木修司、大田智美、中村志保子、永井琢哉、中原舞、吉信公美子、荒木喜美、荒木正健、帖佐悦男
  • 学会等名: 第89回日本整形外科学会学術総会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
  • 年月日: 2016-05-12 – 2016-05-15
• [備考] Database for the Exchangeable Gene Trap Clones
  • URL: http://egtc.jp/action/main/index