STAT-C/EBPβ経路を介した慢性骨髄性白血病幹細胞枯渇療法の開発

2015 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 25430149
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 横田 明日美 京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 研究員 (00571556)
• 研究分担者: 平位 秀世 京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (50315933)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• キーワード: 転写因子 / 慢性骨髄性白血病

研究実績の概要

最終年度の平成27年度は、STAT5によるC/EBPβの発現制御機構の解明と、マウスCMLモデルにおけるC/EBPβを介したIFNαの効果を明らかにするため研究を行った。
STAT5による制御機構については、京都府立医科大学ゲノム医科学教室との共同研究によって、クロマチン免疫沈降産物の次世代シーケンス解析（ChIP-seq）を行った。これまで、C/EBPβ遺伝子の上流と下流の近位領域では、STAT5が結合し転写活性化を行なう領域は同定できなかった。今回のChIP-seqによって、C/EBPβ遺伝子の下流約75kbの領域に、BCR-ABLシグナル依存性にSTAT5が結合する部位を新たに同定した。この領域は、種間で高度に保存されており、STAT5の転写活性化がより強く起こるとされる、2つのSTAT5結合モチーフがタンデムに並んでいる部位であることが分かった。現在この領域のエンハンサー活性について、より詳細に検討を行っている。
これまでの検討によって、C/EBPβの発現を効果的に誘導することができるサイトカインとしてIFNαを同定していたことから、CMLマウスへのIFNαの投与実験を行った。C/EBPPβを介したIFNαの効果を明らかにするために、野生型（WT）及びC/EBPβノックアウト（KO）マウスの骨髄細胞にレトロウイルスにてBCR-ABLを導入して得られた白血病細胞を、1次レシピエントに移植することでCMLモデルを作成した。IFNαの産生を体内で誘導するPolyI:Cをこれらマウスに投与し、1次レシピエントにおける白血病幹細胞の頻度と、2次移植による白血病幹細胞活性の評価を行った。IFNαはCML白血病幹細胞を有意に減少させ、この効果の発現にはC/EBPβを介した経路が重要であることが明らかとなった。

研究成果

• [雑誌論文] Accelerated apoptosis of peripheral blood monocytes in Cebpb-deficient mice. (2015)
  • 著者名/発表者名: Tamura A, Hirai H, Yokota A, Sato A, Shoji T, Kashiwagi T, Iwasa M, Fujishiro A, Miura Y, Maekawa T.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 巻: 464 ページ: 654-658
  • DOI: doi:10.1016/j.bbrc.2015.07.045
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Non-Steady-State Hematopoiesis Regulated by the C/EBPβ Transcription Factor. (2015)
  • 著者名/発表者名: Hirai H, Yokota A, Tamura A, Sato A, Maekawa T.
  • 雑誌名: Cancer Sci 巻: 106 ページ: 797-802
  • DOI: doi:10.1111/cas.12690
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Isolation of mesenchymal stromal/stem cells from small-volume umbilical cord blood units that do not qualify for the banking system. (2015)
  • 著者名/発表者名: Yoshioka S, Miura Y, Iwasa M, Fujishiro A, Yao H, Miura M, Fukuoka M, Nakagawa Y, Yokota A, Hirai H, Ichinohe T, Takaori-Kondo A, Maekawa T.
  • 雑誌名: Int J Hematol 巻: 102 ページ: 218-229
  • DOI: doi 10.1007/s12185-015-1828-7
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [学会発表] 慢性骨髄性白血病の病態形成における転写因子C/EBPβの機能 (2016)
  • 著者名/発表者名: 横田明日美、平位秀世、林 慶紘、前川 平
  • 学会等名: 第20回造血器腫瘍研究会
  • 発表場所: 千葉
  • 年月日: 2016-02-12 – 2016-02-12
• [学会発表] C/EBPβ Isoforms Distinctively and Collaboratively Regulate the Behavior of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Regenerative Conditions. (2015)
  • 著者名/発表者名: Sato A, Hirai H, Yokota A, Tamura A, Shoji T, Kashiwagi T, Iwasa M, Fujishiro A, Miura Y, Maekawa T
  • 学会等名: American Society of Hematology, 57th Annual Meeting
  • 発表場所: Orland, FL, USA
  • 年月日: 2015-12-07 – 2015-12-07
  • 国際学会
• [学会発表] Bortezomib Attenuates Adhesion of B Cell Precursor Acute Lymphoblastic Lleukemia Cells to Bone Marrow Mesenchymal Stromal/Stem Cells Via Regulating SPARC Expression. (2015)
  • 著者名/発表者名: Iwasa M, Miura Y, Fujishiro A, Fujii S, Sugino N, Tamura A, Sato A, Yokota A, Yoshioka S, Kito K, Ando A, Hirai H, Takaori-Kondo A, Ichinohe T, Maekawa T
  • 学会等名: American Society of Hematology, 57th Annual Meeting
  • 発表場所: Orland, FL, USA
  • 年月日: 2015-12-07 – 2015-12-07
  • 国際学会
• [学会発表] A Constitutively-Active ABL Family Kinase, TEL-ARG, Induces Lethal Mastocytosis through Sensitizing Hematopoietic Stem/Progenitor Cells to IL-3. (2015)
  • 著者名/発表者名: Yokota A, Hirai H, Shoji T, Maekawa T, Okuda K
  • 学会等名: American Society of Hematology, 57th Annual Meeting
  • 発表場所: Orland, FL, USA
  • 年月日: 2015-12-06 – 2015-12-06
  • 国際学会
• [学会発表] Csf1r Is a Downstream Target of C/EBPβ in Ly6C- Monocytes. (2015)
  • 著者名/発表者名: Tamura A, Hirai H, Yokota A, Sato A, Shoji T, Kashiwagi T, Iwasa M, Fujishiro A, Miura Y, Maekawa T
  • 学会等名: American Society of Hematology, 57th Annual Meeting
  • 発表場所: Orland, FL, USA
  • 年月日: 2015-12-05 – 2015-12-05
  • 国際学会
• [学会発表] Vitamin K2 Supports Hematopoiesis through Acting on Bone Marrow Mesenchymal Stromal/Stem Cells. (2015)
  • 著者名/発表者名: Fujishiro A, Miura Y, Iwasa M, Fujii S, Tamura A, Sato A, Yokota A, Sugino N, Hirai H, Ando A, Takaori-Kondo A, Ichinohe T, Maekawa T
  • 学会等名: American Society of Hematology, 57th Annual Meeting
  • 発表場所: Orland, FL, USA
  • 年月日: 2015-12-05 – 2015-12-05
  • 国際学会
• [学会発表] M-CSF receptor is a downstream target of C/EBPβ in Ly6C monocytes development. (2015)
  • 著者名/発表者名: Tamura A, Hirai H, Yokota A, Sato A, Shoji T, Iwasa M, Fujishiro A, Miura Y, Maekawa T
  • 学会等名: 第77回日本血液学会学術総会
  • 発表場所: 金沢
  • 年月日: 2015-10-18 – 2015-10-18
• [学会発表] Effects of low-dose irradiation on human bone marrow mesenchymal stromal/stem cells. (2015)
  • 著者名/発表者名: Fujishiro A, Miura Y, Iwasa M, Tamura A, Sato A, Yokota A, Hirai H, Ando A, Maekawa T, Ichinohe T
  • 学会等名: 第77回日本血液学会学術総会
  • 発表場所: 金沢
  • 年月日: 2015-10-17 – 2015-10-17
• [学会発表] C/EBPβ facilitates cell cycle entry of HSPCs in response to hematological stresses. (2015)
  • 著者名/発表者名: Sato A, Hirai H, Tamura A, Yokota A, Shoji T,Iwasa M, Fujishiro A, Miura Y, Maekawa T
  • 学会等名: 第77回日本血液学会学術総会
  • 発表場所: 金沢
  • 年月日: 2015-10-16 – 2015-10-16
• [学会発表] TEL-ARG and TEL-ABL activate distinct differentiation pathways in response to IL-3. (2015)
  • 著者名/発表者名: Yokota A, Hirai H, Shoji T, Maekawa T, Okuda K
  • 学会等名: 第77回日本血液学会学術総会
  • 発表場所: 金沢
  • 年月日: 2015-10-16 – 2015-10-16
• [学会発表] ボルテゾミブは前駆B細胞性白血病細胞の骨髄間葉系幹細胞への接着を減弱させる。 (2015)
  • 著者名/発表者名: 岩佐磨佐紀、三浦康生、藤城綾、杉野典子、佐藤淳至、田村彰広、横田明日美、木藤克之、平位秀世、安藤朗、高折晃史、一戸辰夫、前川平
  • 学会等名: 第74回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2015-10-10 – 2015-10-10
• [学会発表] TEL-ABLとTEL-ARGは異なる細胞分化経路を活性化して白血病発症を誘導する. (2015)
  • 著者名/発表者名: 横田明日美、平位秀世、庄司月美、前川 平、奥田恵子
  • 学会等名: 第74回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2015-10-10 – 2015-10-10
• [学会発表] IFNα promotes differentiation of BCR-ABL+ leukemic cells through upregulating C/EBPβ. (2015)
  • 著者名/発表者名: Yokota A, Hirai H, Hayashi Y, Tamura A, Sato A, Iwasa M, Fujishiro A, Shoji T, Miura Y, Maekawa T
  • 学会等名: International Society for Experimental Hematology, 44th Annual Scientific Meeting
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2015-09-17 – 2015-09-17
  • 国際学会
• [備考] 京都大学医学部附属病院輸血細胞治療部
  • URL: http://dtm.kuhp.kyoto-u.ac.jp