制御性T細胞の除去によるがん免疫応答の増強

2013 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 25430161
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 研究機関: 川崎医療福祉大学
• 研究代表者: 中山 睿一 川崎医療福祉大学, 医療福祉学部, 教授 (60180428)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• キーワード: 肺がん / 制御性T細胞 / 腫瘍内浸潤リンパ球 / ケモカイン受容体

研究概要

肺がん20症例について、それぞれの症例から末梢血サンプルと外科手術材料を得て、制御性T細胞（Treg）の解析を行った。Tregの解析は、Foxp3 low CD45RA+（Fr. I）Foxp3 high CD45RA-（Fr. II）およびFoxp3 low CD45RA-（Fr. III）について解析した。Fr. Iは、resting Treg、Fr. IIは、activated Treg、そしてFr. IIIは、non Tregである。肺がん患者末梢血リンパ球および摘出肺がん組織内浸潤リンパ球（TIL）に含まれるこれらのTreg集団について解析し、次のことが明らかになった。TILでは、末梢血リンパ球に比べて、activated Tregおよびnon Tregの頻度が高いが、resting Tregの頻度は低いまま差はなかった。この結果は、activated Tregおよびnon Tregが末梢血中から腫瘍組織内へ集積していることを示唆している。さらに、腫瘍組織内で、resting Tregの頻度上昇を認めなかったことは、resting Tregからactivated Tregへ変化していることを示唆するものと考えられる。
さらに、それぞれの細胞集団について、ケモカイン受容体CCR4の発現を検討した。その結果、TILのactivated Tregおよびnon Tregで、末梢血リンパ球に比べて、CCR4の発現低下を認めた。この結果は、CCR4が関与する遊走によって、activated Tregおよびnon Tregの腫瘍局所への遊走が起こっていることを示唆している。肺がんにおいてケモカインによるactivated Tregの集積が明らかになったが、肺がんの免疫治療戦略を構築する上で重要な示唆を与える知見と考えられる。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

制御性T細胞の詳細な解析には、FACSを用いた熟練した技術が要求される。研究実績の概要に記したように、CD45RA発現とFoxp3発現により、フラクションI～III（Fr. I～III）を分離して解析し、安定した結果を得ている。研究の初年度の目的は順調に達成している。

今後の研究の推進方策

本年度の研究によって、肺がんにおけるTregの集積が明らかになったが、今後、Tregの除去とそれによる免疫の増強を検討する。抗ヒトCCR4モノクローナル抗体（KM2760）は、強いADCC活性を有する抗体であるが、この抗体を用いてactivated Tregを除去できるか否かを種々のアッセイ系を用いて検討する。まず、ヒト末梢血リンパ球を用いて、CCR4陽性CD25陽性 Tregを分離・精製し、この細胞集団のケモカインCCL22/MDC濃度勾配による遊走を明らかにする。この反応系に抗CCR4抗体を加え遊走Treg細胞集団を除去できるか否かを検討する。さらに、T細胞反応のTregによる増殖抑制反応が、あらかじめTregを抗CCR4抗体で処理することによって、解除できるか否かを検討する。これらの検討によって、抗CCR4抗体によるTreg除去の機構が明らかになるであろう。これらの事実をもとに、Treg除去による免疫増強をがん治療へ応用するための基盤を構築する。

研究成果

• [雑誌論文] Vaccination with NY-ESO-1 overlapping peptides mixed with Picibanil OK-432 and montanide ISA-51 in patients with cancers expressing the NY-ESO-1 antigen. (2014)
  • 著者名/発表者名: Wada H, Isobe M, Kakimi K, Mizote Y, Eikawa S, Sato E, Takigawa N, Kiura K, Tsuji K, Iwatsuki K, Yamasaki M, Miyata H, Matsushita H, Udono H, Seto Y, Yamada K, Nishikawa H, Pan L, Venhaus R, Oka M, Doki Y, Nakayama E.
  • 雑誌名: J. Immunother. 巻: 37(2) ページ: 84-92
  • DOI: 10.1097/CJI.0000000000000017.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Production of NY-ESO-1 peptide/DRB1*08:03 tetramers and ex vivo detection of CD4 T-cell responses in vaccinated cancer patients. (2014)
  • 著者名/発表者名: Mizote Y, Uenaka A, Isobe M, Wada H, Kakimi K, Saika T, Kita S, Koide Y, Oka M, and Nakayama E.
  • 雑誌名: Vaccine 巻: 32(8) ページ: 957-964
  • DOI: 10.1016/j.vaccine.2013.12.042.
  • 査読あり
• [雑誌論文] TLR4 and NLRP3 inflammasome activation in monocytes by N-propionyl cysteaminylphenol-maleimide-dextran (NPCMD). (2014)
  • 著者名/発表者名: Mizote Y, Wakamatsu K, Ito S, Uenaka A, Ohue Y, Kurose K, Isobe M, Ito A, Tamura Y, Honda H, Yamashita T, Nohara S, Oka M, Jimbow K, Nakayama E.
  • 雑誌名: J. Dermatol. Sci. 巻: 73(3) ページ: 209-215
  • DOI: 10.1016/j.jdermsci.2013.11.006.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Melanoma-targeted chemo-thermotherapy and in situ peptide immunotherapy through HSP production by using melanogenesis substrate, NPrCAP and magnetite nanoparticles. (2013)
  • 著者名/発表者名: Jimbow K, Ishii-Osai Y, Ito S, Tamura Y, Ito A, Yoneta A, Kamiya T, Yamashita T, Honda H, Wakamatsu K, Murase K, Nohara S, Nakayama E, Hasegawa T, Yamamoto I, and Kobayashi T.
  • 雑誌名: Journal of Skin Cancer 巻: 2013 ページ: -
  • DOI: 10.1155/2013/742925.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Establishment of animal models to analyze the kinetics and distribution of human tumor antigen-specific CD8+ T cells. (2013)
  • 著者名/発表者名: Muraoka D, Nishikawa H, Noguchi T, Wang L, Harada N, Guilaume P, Luescher I, Uenaka A, Nakayama E, Old LJ, Kato T, and Shiku H.
  • 雑誌名: Vaccine 巻: 31(17) ページ: 2110-2118
  • DOI: 10.1016/j.vaccine.2013.02.056.
  • 査読あり
• [雑誌論文] T-cell receptor repertoires of tumor-infiltrating lymphocytes after hyperthermia using functionalized magnetite nanoparticles. (2013)
  • 著者名/発表者名: Ito A, Yamaguchi M, Okamoto N, Sanematsu Y, Kawabe Y, Wakamatsu K, Ito S, Honda H, Kobayashi T, Nakayama E, Tamura Y, Okura M, Yamashita T, Jimbow K, and Kamihira M.
  • 雑誌名: Nanomedicine 巻: 8(6) ページ: 891-902
  • DOI: 10.2217/nnm.12.142.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Prostate cancer progression correlates with increased humoral immune response to a human endogenous retrovirus GAG protein. (2013)
  • 著者名/発表者名: Reis BS, Jungbluth AA, Frosina D, Holz M, Ritter E, Nakayama E, Ishida T, Obata Y, Carver B, Scher H, Scardino P, Slovin S, Subudhi SK, Reuter VE, Savage C, Allison JP, Melamed JM, Jager E, Ritter G, Old LJ, Gnjatic S.
  • 雑誌名: Clin. Cancer Res. 巻: 19(22) ページ: 6112-6125
  • DOI: 10.1158/1078-0432.CCR-12-3580.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Genetic variants of immunoglobulin g and k chains influence humoral immunity to the cancer-testis antigen XAGE-1b (GAGED2a) in patients with non-small cell lung cancer. (2013)
  • 著者名/発表者名: Pandey J, Namboodiri A, Ohue Y, Oka M, Nakayama E.
  • 雑誌名: Clin. Exp. Immunol. 巻: 176(1) ページ: 78-83
  • DOI: 10.1111/cei.12247.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Which patients respond best to hepatitis B vaccination after a hepatitits B vitus-related liver transplantation? (2013)
  • 著者名/発表者名: Takaki A, Yagi T, Yasunaka T, Sadamori H, Shinoura S, Umeda Y, Yoshida R, Sato D, Nobuoka D, Utsumi M, Yasuda Y, Nakayama E, Miyake Y, Ikeda F, Shiraha H, Nouso K, Fujiwara T, and Yamamoto K.
  • 雑誌名: J. Gastroenterol. 巻: 48(12) ページ: 1373-1383
  • DOI: 10.1007/s00535-013-0763-8.
  • 査読あり
• [雑誌論文] がん患者における免疫モニタリング―評価法と国際標準化 (2013)
  • 著者名/発表者名: 和田 尚、中山睿一
  • 雑誌名: 週刊 医学のあゆみ がんの免疫制御―研究と臨床の最前線 巻: 244(9) ページ: 871-877
• [雑誌論文] 免疫バイオマーカーと抗腫瘍効果 (2013)
  • 著者名/発表者名: 和田 尚、中山睿一
  • 雑誌名: 実験医学 増刊 腫瘍免疫学とがん免疫療法 巻: 31(12) ページ: 204-208
• [学会発表] Depletion of Tregs from PBMCs by treatment with defucosylated anti-CCR4 mAb. (2013)
  • 著者名/発表者名: 黒瀬浩史、大植祥弘、堅田洋佑、阿部公亮、磯辺みどり、松本博文、上中明子、中山睿一、岡 三喜男
  • 学会等名: 第54回日本肺癌学会総会
  • 発表場所: ホテルニューオータニ東京（東京都千代田区紀尾井町4-1）
  • 年月日: 20131121-20131121
• [学会発表] Immune response to XAGE-1b (GAGED2a) in NSCLC patients and its clinical relevance. (2013)
  • 著者名/発表者名: 大植祥弘、黒瀬浩史、松本博文、阿部公亮、堅田洋佑、磯辺みどり、上中明子、福田 実、中山睿一、岡 三喜男
  • 学会等名: 第54回日本肺癌学会総会
  • 発表場所: ホテルニューオータニ東京（東京都千代田区紀尾井町4-1）
  • 年月日: 20131121-20131121
• [学会発表] ホジキンリンパ腫におけるNY-ESO-1 に対する液性および細胞性免疫応答 (2013)
  • 著者名/発表者名: 鈴木 進、石田高司、森 芙美子、伊藤 旭、楠本 茂、小松弘和、吉川和宏、中山睿一、飯田真介、新実彰男、上田龍三
  • 学会等名: 第72回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: パシフィコ横浜（神奈川県横浜市西区みなとみらい1-1-1）
  • 年月日: 20131005-20131005
• [学会発表] NY-ESO-1重複長ペプチドを用いたがんワクチン第I相臨床試験 (2013)
  • 著者名/発表者名: 西塔拓郎、和田 尚、磯辺みどり、垣見和宏、榮川伸吾、大植祥弘、西川博嘉、岡 三喜男、森 正樹、土岐祐一郎、中山睿一
  • 学会等名: 第72回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: パシフィコ横浜（神奈川県横浜市西区みなとみらい1-1-1）
  • 年月日: 20131004-20131004
• [学会発表] NY-ESO-1(NY-ESO-1 91-110)ペプチドワクチンによる抗体CD4・CD8 T細胞免疫応答の誘導 (2013)
  • 著者名/発表者名: 榮川伸吾、垣見和宏、磯辺みどり、和田 尚、上中明子、葛島清隆、西川博嘉、鵜殿平一郎、岡 三喜男、中山睿一
  • 学会等名: 第72回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: パシフィコ横浜（神奈川県横浜市西区みなとみらい1-1-1）
  • 年月日: 20131004-20131004
• [学会発表] 新規製剤NPCMDによるTLR4、NLRP3の活性化とT細胞免疫応答の賦活化 (2013)
  • 著者名/発表者名: 溝手 雄、若松一雅、伊藤祥輔、上中明子、黒瀬浩史、大植祥弘、西尾祐美、岡 三喜男、神保孝一、中山睿一
  • 学会等名: 第72回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: パシフィコ横浜（神奈川県横浜市西区みなとみらい1-1-1）
  • 年月日: 20131004-20131004
• [学会発表] Depletion of Tregs from PBMCs by treatment with defucosylated anti-CCR4 mAb. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kurose K, Ohue Y, Mizote Y, Isobe M, Uenaka A, Oka M, Nakayama E.
  • 学会等名: 21st Annual Cancer Research Institute International Cancer Immunotherapy Symposium
  • 発表場所: Grand Hyatt Hotel New York （109 East 42nd Street New York, USA）
  • 年月日: 20130930-20130930
• [学会発表] Prolonged overall survival in XAGE-1b(GAGED2a) antibody positive NSCLC patients. (2013)
  • 著者名/発表者名: Ohue Y, Kurose K, Mizote Y, Matsumoto H, Isobe M, Uenaka A, Fukuda M, Oka M, Nakayama E.
  • 学会等名: 21st Annual Cancer Research Institute International Cancer Immunotherapy Symposium
  • 発表場所: Grand Hyatt Hotel New York （109 East 42nd Street New York, USA）
  • 年月日: 20130930-20130930
• [学会発表] Depletion of Tregs from PBMCs by treatment with defucosylated anti-CCR4 mAb. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kurose K, Ohue Y, Mizote Y, Isobe M, Uenaka A, Oka M, Nakayama E.
  • 学会等名: 第11回日本臨床腫瘍学会学術集会
  • 発表場所: 仙台国際センター（宮城県仙台市青葉区青葉山無番地）
  • 年月日: 20130829-20130829
• [学会発表] Immune response to XAGE-1b (GAGED2a) in NSCLC patients and its clinical relevance. (2013)
  • 著者名/発表者名: Ohue Y, Kurose K, Mizote Y, Matsumoto Y, Isobe M, Fukuda M, Uenaka A, Nakayama E, Oka M.
  • 学会等名: 第11回日本臨床腫瘍学会学術集会
  • 発表場所: 仙台国際センター（宮城県仙台市青葉区青葉山無番地）
  • 年月日: 20130829-20130829
• [学会発表] A phase I study of vaccination with 20-mer NY-ESO-1f (NY-ESO-1 91-110) peptide. (2013)
  • 著者名/発表者名: Isobe M, Eikawa S, Kakimi K, Wada H, Mizote Y, Ohue Y, Kurose K, Uenaka A, Oka M, Nakayama E.
  • 学会等名: 第17回日本がん免疫学会総会
  • 発表場所: ANAクラウンプラザホテル宇部（山口県宇部市相生町8-1）
  • 年月日: 20130703-20130703
• [学会発表] Depletion of Tregs from PBMCs by treatment with defucosylated anti-CCR4 mAb. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kurose K, Eikawa S, Mizote Y, Ohue Y, Isobe M, Uenaka A, Oka M, Nakayama E.
  • 学会等名: 第17回日本がん免疫学会総会
  • 発表場所: ANAクラウンプラザホテル宇部（山口県宇部市相生町8-1）
  • 年月日: 20130703-20130703
• [学会発表] Immune response to XAGE-1b (GAGED2a) in NSCLC patients and its clinical relevance. (2013)
  • 著者名/発表者名: Ohue Y, Kurose K, Mizote Y, Matsumoto Y, Isobe M, Uenaka A, Fukuda M, Oka M, Nakayama E.
  • 学会等名: 第17回日本がん免疫学会総会
  • 発表場所: ANAクラウンプラザホテル宇部（山口県宇部市相生町8-1）
  • 年月日: 20130703-20130703
• [学会発表] 新規製剤N-propionyl cysteaminylphenol-maleimid-dextran(NPCMD)による免疫応答賦活効果 (2013)
  • 著者名/発表者名: 溝手 雄、若松一雅、伊藤祥輔、上中明子、黒瀬浩史、大植祥弘、西尾祐美、岡 三喜男、神保孝一、中山睿一
  • 学会等名: 第17回日本がん免疫学会総会
  • 発表場所: ANAクラウンプラザホテル宇部（山口県宇部市相生町8-1）
  • 年月日: 20130703-20130703
• [学会発表] 非小細胞肺癌患者における癌精巣抗原XAGE-1dに対する免疫応答 (2013)
  • 著者名/発表者名: 黒瀬浩史、松本博文、大植祥弘、阿部公亮、榮川伸吾、溝手 雄、磯辺みどり、上中明子、永安 武、中山睿一、岡 三喜男
  • 学会等名: 第53回日本呼吸器学会学術講演会
  • 発表場所: 東京国際フォーラム（東京都千代田区丸の内3丁目5）
  • 年月日: 20130419-20130419
• [学会発表] がん精巣抗原XAGE-1bを標的にしたがん免疫療法の開発 (2013)
  • 著者名/発表者名: 大植祥弘、橘髙 誠、黒瀬浩史、池田征樹、阿部公亮、清水大樹、毛利圭二、加藤茂樹、尾長谷靖、小橋吉博、福田 実、中山睿一、岡 三喜男
  • 学会等名: 第53回日本呼吸器学会学術講演会
  • 発表場所: 東京国際フォーラム（東京都千代田区丸の内3丁目5）
  • 年月日: 20130419-20130419
• [学会発表] Depletion of Tregs from PBMCs by treatment with defucosylated anti-CCR4 mAb. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kurose K, Eikawa S, Mizote Y, Ohue Y, Isobe M, Uenaka A, Oka M, Nakayama E.
  • 学会等名: 104nd Annual Meeting of American Association of Cancer Research (AACR)
  • 発表場所: Walter E. Washington Convention Center （801 Mt. Vernon Place NW, Washington, DC, USA）
  • 年月日: 20130406-20130406
• [学会発表] Immune response to XAGE-1b (GAGED2a) in NSCLC patients and its clinical relevance. (2013)
  • 著者名/発表者名: Ohue Y, Kurose K, Eikawa S, Mizote Y, Matsumoto H, Isobe M, Uenaka A, Fukuda M, Nakayama E, Oka M.
  • 学会等名: 104nd Annual Meeting of American Association of Cancer Research (AACR)
  • 発表場所: Walter E. Washington Convention Center （801 Mt. Vernon Place NW, Washington, DC, USA）
  • 年月日: 20130406-20130406
• [備考] 免疫研究室
  • URL: http://www.med-gakkai.org/kmsrd/igakukyoiku.html