• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 課題ページに戻る

2015 年度 実績報告書

タンパク質シェル構造体エンカプスリンの構造形成原理の解明

研究課題

研究課題/領域番号 25440015
研究機関東京農工大学

研究代表者

野口 恵一  東京農工大学, 学術研究支援総合センター, 准教授 (00251588)

研究期間 (年度) 2013-04-01 – 2016-03-31
キーワードナノ構造体 / ナノ粒子 / タンパク質シェル構造体 / ウィルス様粒子 / 結晶構造 / X線回折 / 認識配列
研究実績の概要

エンカプスリン は、分子量 30-40 kDa の単一のタンパク質サブユニットが自己集合することにより形成される直径 20-55 nm の中空の球状ナノ構造体である。特定の酵素を内包することにより、効率的な反応場や細胞にとって毒性のある基質や生産物を隔離する場を提供する細胞内微小区画であると考えられており、構造体のサイズ、安定性、内包する酵素を制御することが可能となれば、マイクロリアクターやドラッグデリバリーキャリアーとしての活用が期待される。本研究では、Rhodococcus. erythropolis N771由来エンカプスリンを対象に、エンカプスリンの構造形成や酵素取込機構を明らかにすることを目的として、構造体の立体構造や内包酵素の選択性などに与える影響について検討した。
エンカプスリンの立体構造情報を得るために、組換え体の発現・精製条件の最適化と結晶化条件の探索を行った。その結果、X線回折測定に適した外形と大きさの結晶が成長する2種類の条件を得ることに成功し、高エネルギー加速器研究機構の放射光施設フォトンファクトリーにおいて、分解能3.7Åの回折データを収集することができた。現在、構造精密化を進めており、解析が終了次第論文発表を行う予定である。また、エンカプスリンに内包されるタンパク質の取り込み機構を明らかにするために、内包タンパクに付加される認識配列の探索を行った。その結果、Rhodococcus. erythropolis N771由来エンカプスリンの遺伝子の上流にコードされているペルオキシダーゼのC末端部の40残基程度配列が認識配列であることが推定された。さらに、推定された配列を緑色蛍光タンパク質やルシフェラーゼのC末端に付加することにより、これら外来タンパク質をエンカプスリンに内包させることに成功した。

  • 研究成果

    (5件)

すべて 2016 2015

すべて 雑誌論文 (1件) 学会発表 (4件)

  • [雑誌論文] タンパク質シェル構造体エンカプスリンの構造化学的研究2015

    • 著者名/発表者名
      野口恵一, 藤井基子, 福谷洋介, 尾高雅文, 養王田正文
    • 雑誌名

      Photon Factory Activity Report 2014

      巻: 32 ページ: 359

  • [学会発表] マラリア原虫 Plasmodium falciprum 由来Exp2 の発現及び人工膜を利用した機能解析2016

    • 著者名/発表者名
      袴田 一晃、渡辺 寛和、川野 竜司、野口 恵一、養王田 正文
    • 学会等名
      第4回日本生物工学会東日本支部コロキウム
    • 発表場所
      東京工業大学大岡山キャンパス(東京都)
    • 年月日
      2016-03-01 – 2016-03-01
  • [学会発表] 好熱性シアノバクテリア由来 Carboxysome 外殻形成機構に関する研究2015

    • 著者名/発表者名
      中口雄貴、三木智寛、瀧川拓哉、山口慶、岩渕紳一郎、堂前直、野口恵一、養王田正文、尾高雅文
    • 学会等名
      BMB(Biochemistry and Molecular Biology)2015 /第38回日本分子生物学会年会・第88回日本生化学会大会 合同大会
    • 発表場所
      神戸ポートアイランド(兵庫県・神戸市)
    • 年月日
      2015-12-01 – 2015-12-01
  • [学会発表] 好熱性シアノバクテリア由来 RuBisCO の形成機構の解明2015

    • 著者名/発表者名
      川北賢宏、三木智寛、中口雄貴、仲本準、野口恵一、養王田正文、尾高雅文
    • 学会等名
      第15回 日本蛋白質科学会年会
    • 発表場所
      あわぎんホール(徳島県)
    • 年月日
      2015-06-25 – 2015-06-25
  • [学会発表] 機能性ナノ粒子構築のための Rhodococcus erythropolis N771株由来 Encapsulin への外来タンパク質の導入2015

    • 著者名/発表者名
      藤井基子、田村彰朗、野口恵一、尾高雅文、養王田正文
    • 学会等名
      第15回 日本蛋白質科学会年会
    • 発表場所
      あわぎんホール(徳島県)
    • 年月日
      2015-06-24 – 2015-06-25

URL: 

公開日: 2017-01-06  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi