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上皮細胞の細胞間接着(AJ)に局在するF-アクチンは、細胞層の運動や変形に重要であるが、その制御機構は完全には明らかでない。我々は、神経管形成時において、神経上皮細胞層AJのF-アクチンが極性収縮する際に、forminの一種であるDAAM1が関与することを見出した。さらにDAAM1は種々の培養上皮細胞でAJに分布が認められたものの、その役割については未解明であった。そこでDAAM1による上皮細胞AJのF-アクチン制御の可能性について検討を行った。
まずDAAM1のAJへの局在機構について検討した結果、N末端領域で分布することが分かった。またDAAM1のN末端領域の免疫沈降物のMS解析を行ったところ、種々の分子との相互作用が確認された。その中に含まれるAJ分子のひとつをノックダウンすると、DAAM1のAJ分布が減少したことから、DAAM1の分布への関与が示唆された。
次に、DAAM1が上皮細胞AJのF-アクチンおよびAJ分子に与える影響について検討した。その結果、DAAM1をノックダウンした細胞でAJのF-アクチンが減少傾向を示し、また一部のAJではF-アクチンが大きな構造変化を起こしていた。また、AJ分子のひとつについて分布を調べたところ、apicalへの分布が減少し、lateralへの分布が増えることが分かった。さらにDAAM1ノックダウン細胞において、Ca2+スイッチにより細胞間接着を再形成させたところ、接着形成自体にはほとんど影響しなかったものの、接着形成後のAJにおいてF-アクチンおよび上記AJ分子の分布が変化したことから、細胞間接着の維持に関与することが示唆された。
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