| 研究実績の概要 |
HeLa細胞にYIPF1, YIPF2とYIP6を外来性に発現させたところ，YIP1とYIP2は50%以上の細胞で高効率に発現したが，YIP6は10%以下の細胞で低効率でしか発現しなかった。そこで，YIPF6がERADあるいはリソソームで分解されているかどうかを，阻害剤を用いた実験で確認した。YIPF6をトランスフェクションした細胞をエポキソマイシン処理，あるいはバフィロマイシンA1処理したところ，いずれの処理でもYIPF6の量が増加した。したがって，過剰発現したYIPF6はERADで分解されるとともに，一部はリソソームに輸送されて分解されることが明らかとなった。YIPF1についても同様に，両試薬それぞれでYIPF1の増加が観察され，過剰発現したYIPF1はERADで分解されるとともに，一部はリソソームに輸送されて分解されることが明らかとなった。しかしながら，YIPF2については，いずれの試薬でもタンパク質量の増加が見られなかったため，YIPF1，YIPF6と異なり安定であることが示唆された。一方，内在性のYIPF1, YIPF2, YIPF6の量は，どちらの試薬によっても変化しなかった。したがって，内在性のYIPF1, YIPF2, YIPF6は安定であり，ERADやリソソームでの分解を受けていないことが明らかとなった。以上の結果から，YIPF6の発現量が低い理由として，ERADやリソソームでの分解が寄与していることが示唆されたものの，YIPF1も同様の調節を受けているにもかかわらず，YIPF1の発現量が高いことから，YIPF6は主として合成レベルでの調節を受けていることが示唆された。YIPF6もYIPF1も同じベクターにより同じプロモーター下で発現させているため，タンパク質翻訳レベルでの差がある可能性が考えられた。
|
