研究実績の概要 |
アスパラガス冬季伏せ込み栽培における栽培中の光環境制御がルチンの生合成に及ぼす影響を検討するため、光環境を変えて栽培したアスパラガスからRNAを抽出し、逆転写を行って得たcDNAをテンプレートに、ルチン生合成に関わるCHS, CHI, F3H, F3’H, FLS,さらにリファレンスに用いる予定のActin遺伝子についてプライマーの設計、PCR条件やリアルタイムPCRの条件の検討を行った。また、生合成系の最下流である配糖化酵素についてはこれまで同定例が少ないため、他作物で同定された配列を元にプライマーを設計し、クローンニングを試みた。その結果、配糖化酵素以外のすべての遺伝子についてリアルタイムPCR条件が確定できた。また、Actinについては、発現量はグリーンの無補光区、補光区、さらにルチンが含まれないホワイトの各サンプルによる差はほぼ見られず、一定であることが確認された。これにより、Actinはルチン生合成系の遺伝子発現解析時にリファレンスとして用いることが可能であることが確認できた。H27年1月に収穫したアスパラガスのサンプル(無補光区、強光補光区、遮光(ホワイト))から調製したcDNAを用いて、本格的に光環境がルチン生合成系の遺伝子発現に及ぼす影響についての解析を開始した。また配糖化酵素についてはこれまで他植物においても報告がほとんどなく苦労しているが、GT、RTのうちGTについては部分配列を得ることができた。
|