研究課題
組換えヒト新規β-グルカン受容体をカイコ-バキュロウイルス発現系により大量発現させ、ニッケル-キレート樹脂を用いたアフィニティークロマトグラフィーにより精製した。この組換えヒトβ-グルカン受容体は細胞外領域のN末端側にヒスチジンタグが付加された構造を有しており、可溶性タンパク質としてカイコ幼虫体液に分泌された。この細胞外領域は首領域とC型レクチン様ドメインから成り、C型レクチン様ドメインにオリゴ糖鎖が付加していることが知られている。本組換えタンパク質では2つのグリコフォームの存在が確認された。このヒト新規β-グルカン受容体のグルカン結合特異性を解析した結果、従来のヒト免疫細胞β-グルカン受容体のグルカン結合特異性と類似してはいるが、それとは異なる特徴的なグルカン結合特異性を有することが明らかとなった。また、オリゴ糖鎖の違いはグルカン結合特異性に影響しないことも明らかとなった。さらに従来のヒト免疫細胞β-グルカン受容体のGFP融合タンパク質を作製し、それを用いたアッセイ系も確立した。
2: おおむね順調に進展している
本研究では、ヒトβ-グルカン受容体の結合特異性を解明し、食品成分の科学的なハイスループット免疫賦活作用評価法の開発に応用することを目的としており、これまでにカイコ-バキュロウイルス発現系における可溶性組換えヒト新規β-グルカン受容体の作製とグルカン結合特異性の解析に成功している。また、従来のヒトβ-グルカン受容体のGFP融合タンパク質の作製と機能解析も進行している。
ヒト新規β-グルカン受容体のGFP融合タンパク質を作製し、簡便・迅速・安価・高感度の定量的なグルカン結合特異性の解析方法を開発して食品成分の免疫賦活作用評価法に応用する。
当初の計算よりも5円安くなったため。
試薬の購入費の一部に充当する。
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