• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 課題ページに戻る

2014 年度 実施状況報告書

加水分解性タンニンのIgE産生抑制メカニズムおよび構造活性相関の解明

研究課題

研究課題/領域番号 25450191
研究機関九州産業大学

研究代表者

高杉 美佳子  九州産業大学, 工学部, 准教授 (60305802)

研究分担者 山田 耕路  九州大学, (連合)農学研究科(研究院), 教授 (60158186)
研究期間 (年度) 2013-04-01 – 2017-03-31
キーワードタンニン / IgE / アレルギー
研究実績の概要

グルコースに、ガロイル基とヘキサヒドロジフェノイル (HDDP) 基が1個ずつ結合したストリクチニン、2個のガロイル基と1個のHDDP基が結合したテリマグランジンI、3個のガロイル基と1個のHDDP基が結合したテリマグランジンII、1個のガロイル基と2個のHDDP基が結合したカスアリクチン、5個のガロイル基が結合したペンタガロイルグルコースを用い、IgE産生抑制作用とガロイル基の関係を調べた。
IgE産生型ヒト由来B細胞株 (U266) にサンプルを終濃度0~100 uMで添加して3時間培養し、培養上清中のIgE濃度をELISAで測定した。その結果、ストリクチニンは終濃度10~80 uMにおいてIgE産生を10%程度しか抑制せず、終濃度100 uMでも20%程度しかIgE産生を抑制しなかった。また、テリマグランジンI、カスアリクチン、ペンタガロイルグルコースは終濃度20~80 uMでIgE産生を20~30%程度抑制し、3つのサンプルの活性の強さはほとんど変わらなかったが、ペンタガロイルグルコースは終濃度100 uMでテリマグランジンIやカスアリクチンよりも抑制活性が弱い傾向を示した。一方、テリマグランジンIIは終濃度0~100 uMで添加濃度に依存してIgEの産生を抑制しており、終濃度80 uM以上での抑制活性は約50%と本研究に用いたサンプルの中で最も抑制活性が強かった。
これらの結果より、IgE産生抑制活性の発現には、分子内にガロイル基が4個相当以上あることが望ましく、グルコースの1位炭素に結合したガロイル基や4位と6位間のHDDP基も抑制活性の発現に関与している可能性が示唆された。これらのIgE抑制作用は細胞毒性によるものではないことを確認しており、今後、mRNAの発現に及ぼす影響を検討し、作用メカニズムを明らかにする必要がある。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

U266のmRNA発現をreal time PCRで調べる予定であるが、これまでの報告はRT-PCRを用いたものであり、最適なプライマーを検討する必要がある。

今後の研究の推進方策

いくつかのプライマー作成ソフトを用いて、real time PCRに最適なプライマーを見つける。また、改善が見られない場合にはTaqManプローブを用いて検出を行う。

次年度使用額が生じた理由

作用メカニズムを調べるにあたり、PCRに必要なヒートブロック、PCRチューブ用遠心機等の備品の納入が遅れているため。

次年度使用額の使用計画

平成26年度2月から平成27年度にかけて、主にreal time PCRでmRNAの発現を調べることにより、作用メカニズムの解明を行う。

URL: 

公開日: 2016-05-27  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi