2015 年度実績報告書

温帯性多回産卵魚のモデル生物・マミチョグを用いた水温刺激による成熟促進反応の解析

研究課題

研究課題/領域番号	25450312
研究機関	国立研究開発法人水産総合研究センター
研究代表者	清水昭男国立研究開発法人水産総合研究センター, 中央水産研究所, グループ長 (90371830)
研究分担者	筒井和義早稲田大学, 教育・総合科学学術院, 教授 (20163842)
研究期間 (年度)	2013-04-01 – 2016-03-31
キーワード	マミチョグ / 生殖腺刺激ホルモン / 生殖内分泌系 / 水温刺激 / 成熟 / GnRH
研究実績の概要	マミチョグにおいて水温上昇刺激に対する生殖内分泌系の応答を調べるため、自然条件で飼育した成魚を、2月上旬より8℃-11L、16℃-11Lの条件下で6週間飼育した。飼育後、8℃区においては成熟がほとんど進まなかったが、16℃区においては雌雄ともほとんどの個体が完熟状態に達していた。脳下垂体における生殖腺刺激ホルモンmRNAの定量PCRによる測定結果において、FSHβmRNAは常にある程度の発現量を示すとともに水温による差が小さく、4週目のみ16℃の方が有意に高かった。一方、LHβmRNAの発現量は実験開始時には著しく低かったが、16℃の実験区では1週目から高い傾向を示し、3週目以降は16℃の方が8℃よりも著しく高かった。さらに血中ホルモン量のELISA法による定量を行った結果、FSH濃度は水温上昇後4週目及び6週目に増加したが、LH濃度には水温による明らかな差は認められなかった。以上のことから、FSHとLHは水温上昇刺激に対する反応について大きな差があり、水温上昇による成熟促進反応について異なった役割を示すことがわかった。さらに、マミチョグ脳下垂体の生体外培養によって、生殖腺刺激ホルモンの合成と分泌に及ぼすGnRHの影響を調べた。その結果、GnRHはFSHとLH双方の合成と分泌を見かけ上促進したが、LHへの主作用は分泌の促進であってすべての季節において反応するのに対し、FSHへの主作用は合成の促進であって非産卵期には不明瞭になると考えられた。加えて、マミチョグ脳のcDNAを次世代シークエンサーによる解析にかけ、生殖内分泌系関連の遺伝子同定を試みたところ、GnRHR2、GnIH、Kiss2などの重要な遺伝子を同定することができた。