調製したHsp90-NT,Hsp90-CT および Control-NT 充填剤をそれぞれガラス製カラム(50 × 2.0 mm I.D.)に充填し,移動相に 10 mM Tris-HCl 緩衝液 (pH 7.4) を用いてフロンタル・アフィニティー・クロマトグラフィーによりビスコクラウリン型アルカロイドの解離定数 (Kd) を評価した.また,Hsp90-NT および Control-NT カラムにおけるビスコクラウリン型アルカロイドの保持時間 (tR) および保持係数 (k) も併せて測定した.Quercetin,chrysin,rutin,glycyrrhizin,curcumin,wogonin,baicalin,baicalein および ginsenoside の生薬成分の tR をHsp90-NT および Control-NT カラムを用いて測定した.横軸に Control-NT カラムでの tR を,縦軸に Hsp90-NT カラムでの tR をプロットしたところ,直線が傾き 1 の直線であり,この直線よりも左上に位置する生薬成分が,Control-NT よりも Hsp90-NT で保持が大きく,Hsp90 阻害剤である可能性を示唆している.その結果,ビスコクラウリン型アルカロイドである cepharanthine,isotetrandrine,berbamine,cycleanine と生薬成分である quercetin,wogonin,chrysin,rutin が,傾き 1 の直線よりも左上に位置しており,これらは Hsp90 阻害剤である可能性が示唆された.また,glycyrrhizin,baicalin,baicalein,ginsenoside,curcumin は,傾き 1 の直線上あるいは右下に位置しているため,Hsp90阻害剤ではないと推測された.
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