| 研究課題/領域番号 |
25460067
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 研究機関 | 長崎大学 |
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研究代表者 |
谷村 進 長崎大学, 医歯(薬)学総合研究科, 助教 (90343342)
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| 研究分担者 |
武田 弘資 長崎大学, 医歯(薬)学総合研究科, 教授 (10313230)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| キーワード | Caveolae / Myosin / 細胞運動 |
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| 研究概要 |
本研究では、我々がこれまでに見いだした新たな細胞運動調節機構「Myosin1E-SH3P2システム」について、その具体的な分子機構を明らかにすることを目的としている。当該年度は、特に研究実施計画をもとに下記３項目について解析を進め以下に示すような結果を得た。
（１）UNC45-Hsp90によるMyosin1E機能調節の分子メカニズム解明：siRNAの導入によってUNC45の発現を抑制した条件下、あるいはHsp90阻害剤を処理した条件下において、Myosin1Eの発現量には有意な変動は認められなかったが、一方、UNC45の発現を抑制した細胞では、血清刺激に応答したMyosin1Eの細胞内局在が変化すること（細胞運動先導端からの消失が遅れること）を明らかにした。
（２）Myosin1Eによるカベオラ形成調節の分子メカニズム解明：GST pull down assayおよび免疫共沈法により、Myosin1EはそのSH３ドメインを介してCavin3のプロリンリッチ領域と結合することを見いだした。また、Myosin1Eの発現を抑制した際にはCaveolin1およびCavin1/3の発現量が減少すること、さらに、Myosin1E、Caveolin1、あるいはCavin1/3の発現を抑制した条件下では細胞の運動能が低下することを明らかにした。
（３）Myosin1E、Caveolin1、Cavin1/3発現調節の分子メカニズム解明：各種阻害剤を用いた解析により、Cavin3はメチル化阻害剤によって発現量が増加することを明らかにした。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
研究実績の概要に示したように、当初の研究実施計画に沿って解析を進め、各項目ともにおおむね良好な結果を得ており、研究計画全般的には順調に進展していると考える。
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| 今後の研究の推進方策 |
当該年度の研究成果を踏まえながら、研究実施計画に示した各研究項目を推進する予定であるが、特に研究実績の概要欄の項目（２）に重点を置きながら研究を進めることで、Myosin1Eによるカベオラ調節機構と細胞運動の関連を分子レベルで明らかにする。
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| 次年度の研究費の使用計画 |
当該年度は、特に分子生物学的手法を用いたin vitro解析系が多く、細胞培養を伴う実験が当初の計画よりも少なかった。そのため、消耗品費用として計上していた細胞培養用試薬および器具の費用を大幅に節約することができた。
次年度は、これまでの解析結果を踏まえながら、培養細胞系を利用した解析が中心となる予定であり、細胞培養関連の消耗品に当てる。
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