多能性幹細胞のAW551984による心筋分化制御機構の解明

2015 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 25460083
• 研究機関: 国立医薬品食品衛生研究所
• 研究代表者: 安田 智 国立医薬品食品衛生研究所, 再生・細胞医療製品部, 室長 (20381262)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• キーワード: 発生・分化 / 多能性幹細胞 / 心筋細胞

研究実績の概要

ES細胞やiPS細胞といった多能性幹細胞から心筋細胞を作製し、心機能不全の治療に用いる再生医療への試みが現在盛んに行われている。しかしながら、多能性幹細胞の心筋細胞分化を制御している分子機構においては、未だ不明な点も多い。既に昨年度までに、AW551984およびそのヒトホモログVWA5Aの発現をRNAiで抑制することによって、マウスES細胞およびヒトiPS細胞の心筋細胞分化が阻害されることを報告した。今年度は、AW551984とその結合タンパク質の心筋細胞分化の細胞シグナル経路における役割について検討を行った。HEK293細胞を用いたレポーターアッセイにより、多能性幹細胞の心筋細胞分化に重要な役割を果たすことが知られている細胞シグナル経路に、AW551984が関与することが明らかになった。またAW551984をノックダウンしたマウスES細胞で、この細胞シグナル経路を阻害したところ、心筋細胞分化におけるノックダウンの影響が消失した。以前に同定したAW551984と相互作用する心筋細胞分化の制御因子の候補から、この細胞シグナル経路への関与が報告されているものを絞り込んだところ、一つの遺伝子が抽出された。AW551984は相互作用するこの分子の機能を制御することによって、心筋細胞分化に影響を及ぼす可能性が考えられた。さらに詳細なメカニズムに関しては、現在継続して解析を行っている。

研究成果

• [雑誌論文] Ultra-sensitive detection of tumorigenic cellular impurities in human cell-processed therapeutic products by digital analysis of soft agar colony formation. (2015)
  • 著者名/発表者名: Kusakawa S, Yasuda S, Kuroda T, Kawamata S, Sato Y.
  • 雑誌名: Sci. Rep. 巻: 5 ページ: 17892
  • DOI: 10.1038/srep17892
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Highly sensitive droplet digital PCR method for detection of residual undifferentiated cells in cardiomyocytes derived from human pluripotent stem cells. (2015)
  • 著者名/発表者名: Kuroda T, Yasuda S, Matsuyama S, Tano K, Kusakawa S, Sawa Y, Kawamata S, Sato Y.
  • 雑誌名: Regen. Ther. 巻: 2 ページ: 17-23
  • DOI: 10.1016/j.reth.2015.08.001
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Tumorigenicity assessment of human cell-processed therapeutic products. (2015)
  • 著者名/発表者名: Yasuda S, Sato Y.
  • 雑誌名: Biologicals 巻: 43 ページ: 416-421
  • DOI: 10.1038/srep17892
  • 査読あり / 国際共著
• [学会発表] ヒトiPS細胞由来網膜色素上皮細胞中に混入する不死化細胞検出法の開発とその性能評価 (2016)
  • 著者名/発表者名: 黒田 拓也，安田 智，松山 さと子，高田 のぞみ，中島 啓行，草川 森士，梅澤 明弘，松山 晃文，川真田 伸，佐藤 陽治
  • 学会等名: 第15回再生医療学会総会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2016-03-17 – 2016-03-19
• [学会発表] デジタル軟寒天コロニー形成試験を利用した再生医療製品の品質評価 (2016)
  • 著者名/発表者名: 草川 森士，安田 智，黒田 拓也，川真田 伸，佐藤 陽治
  • 学会等名: 第15回再生医療学会総会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2016-03-17 – 2016-03-19
• [学会発表] Simple in vitro method for detection of immortalized cells in human retinal pigment epithelial cells. (2015)
  • 著者名/発表者名: Kuroda T, Yasuda S, Matsuyama S, Takada N, Nakashima H, Kusakawa S, Umezawa A, Matsuyama A, Kawamata S, Sato Y.
  • 学会等名: World Stem Cell Summit 15
  • 発表場所: Atlanta
  • 年月日: 2015-12-10 – 2015-12-12
  • 国際学会
• [学会発表] Digital analysis of soft agar colony formation for highly sensitive detection of tumorigenic cellular impurities in human cell-processed therapeutic products. (2015)
  • 著者名/発表者名: Kusakawa S, Yasuda S, Kuroda T, Kawamata S, Sato Y.
  • 学会等名: World Stem Cell Summit 15
  • 発表場所: Atlanta
  • 年月日: 2015-12-10 – 2015-12-12
  • 国際学会
• [備考] 多能性幹細胞安全情報サイト
  • URL: http://www.nihs.go.jp/cbtp/sispsc/html/index.html