ApollonによるMitosis制御機構

2015 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 25460084
• 研究機関: 国立医薬品食品衛生研究所
• 研究代表者: 内藤 幹彦 国立医薬品食品衛生研究所, 遺伝子医薬部, 部長 (00198011)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• キーワード: Apollon / UBCドメイン / ユビキチン

研究実績の概要

Apollonは細胞死及び細胞周期を制御する分子量５３０Kの巨大なタンパク質である。Apollonによる細胞周期制御機構を明らかにするために、Mitosis制御因子CyclinAとApollon との相互作用について解析し、核膜が消失したM期において両者が結合している事を明らかにした。またApollonをノックダウンした細胞ではM期におけるCyclinAの分解とM期の進行が遅延している事等が明らかになり、ApollonはM期におけるスピンドルチェックポイント非依存的なCyclinA分解に重要な役割を果たしている事を明らかにした。Apollon UBCドメイン活性中心のシステイン残基をアラニンに置換したノックインマウスを作製し、その表現型を解析した。その結果、UBC変異をホモに持つマウスは胎生１５日前後から死亡する例が見られはじめること、変異マウスの胎児や胎盤は野生型と比べて小さく、血管形成に異常を示す胎児や浮腫等が認められる例のあること等がわかった。これらの異常はApollon欠失マウスに見られる異常と酷似しており、マウスの胎生期におけるApollon の機能にはUBCドメインが決定的に重要な役割を果たしている事が示唆された。Apollon UBC変異マウス、Apollon遺伝子欠損マウス及び野生型マウスの胎児繊維芽細胞を培養し、それぞれの細胞溶解液からApollon を免疫沈降し、Apollonと結合して共沈するタンパク質をMSで解析し、Apollonと結合する複数のタンパク質を同定した。今後これらApollon結合タンパク質の機能及びApollonによる制御について解析する予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Degradation of stop codon read-through mutant proteins via the ubiquitin-proteasome system causes hereditary disorders. (2015)
  • 著者名/発表者名: Norihito Shibata, Nobumichi Ohoka, Yusuke Sugaki, Chiaki Onodera, Mizuho Inoue, Yoshiyuki Sakuraba, Daisuke Takakura, Noritaka Hashii, Nana Kawasaki, Yoichi Gondo, and Mikihiko Naito
  • 雑誌名: J. Biol. Chem 巻: 290 ページ: 28428-37
  • DOI: 10.1074/jbc.M115.670901
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [学会発表] Protein knockdown by SNIPER compounds: Application for basic research and cancer therapy (2016)
  • 著者名/発表者名: Naito M, Hattori T, Ohoka N, Shibata N, Shoda T, Demizu Y, Kurihara M
  • 学会等名: 第１０回日米がん合同会議
  • 発表場所: ラハイナ
  • 年月日: 2016-02-16 – 2016-02-20
  • 国際学会
• [学会発表] Protein knockdown by SNIPER compounds, inducers for target protein-selective degradation (2015)
  • 著者名/発表者名: Naito M
  • 学会等名: The 20th 国際化学療法シンポジウム
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2015-12-09 – 2015-12-10
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Degradation of C-terminally extended proteins by stop codon read-through mutations cause hereditary disorders (2015)
  • 著者名/発表者名: Shibata N, Ohoka N, Gondo Y, Naito M
  • 学会等名: 第74回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2015-10-08 – 2015-10-10
• [学会発表] TACC3分解誘導剤によるがん細胞のユビキチン関連死 (2015)
  • 著者名/発表者名: 大岡伸通、柴田識人、服部隆行、内藤幹彦
  • 学会等名: 第19回日本がん分子標的治療学会 学術集会
  • 発表場所: 松山
  • 年月日: 2015-06-10 – 2015-06-12
• [備考] 国立医薬品食品衛生研究所 遺伝子医薬部ホームページ
  • URL: http://www.nihs.go.jp/mtgt/index.html