| 研究課題/領域番号 |
25460108
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 研究機関 | 新潟薬科大学 |
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研究代表者 |
尾崎 昌宣 新潟薬科大学, 薬学部, 教授 (30094650)
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| 研究分担者 |
前田 武彦 新潟薬科大学, 薬学部, 教授 (50271010)
岸岡 史郎 和歌山県立医科大学, 医学部, 教授 (60137255)
木口 倫一 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (90433341)
小林 悠佳 和歌山県立医科大学, 医学部, 助教 (20511562)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| キーワード | セマフォリン |
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| 研究概要 |
本年度の目標は骨転移痛モデルを用いた、行動解析、セマフォリン（sema）関連分子の発現解析および組織学的解析により、骨転移痛へのsemaの関与を決定づけることである。
１．骨転移痛モデルにおける疼痛行動および骨吸収の組織学的解析
マウス肺がんの継代培養細胞であるLewis Lung Carcinoma（LLC）を大腿骨骨髄腔に移植し、骨転移痛モデルの作成手技を確立した。von Frey法による触アロディニア、weight bearing法による下肢への加重、flicking観察による自発痛の測定を行い、骨痛の評価を行った。また、がん細胞の骨組織における増殖をLLC特異的分子であるversicanのRT-PCRにより測定したmRNA発現ならびにGFP安定発現LLC株の蛍光顕微鏡画像観察により、明らかにした。また、細胞増殖による骨代謝異常を明らかにするために、RT-PCR法により、骨吸収および骨形成マーカー分子mRNA発現を調べ、増加することが明らかになったが、その経日的変化に違いがみられた。
２．sema分子の発現解析ならびに発現細胞種の同定
sema3Aが骨代謝に関与することが報告されていることから、申請者はsema発現をRT-PCRにより解析したところ、sema3Aのがん細胞移植後の骨髄組織における発現上昇がみられた。そこで、他のsemaファミリーならびにその受容体についても、リアルタイムPCR法により解析を行い、発現変動を示す分子を特定した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
骨痛モデルの確立ならびに、その骨代謝異常とそれに伴う骨痛の発現を経日的に観察できたが、免疫組織学的解析については結果が集積しておらず、セマフォリン分子の発現細胞種の同定に至ってはいない。
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| 今後の研究の推進方策 |
骨組織の組織学的解析の手技を早急に確立し、セマフォリンシグナル分子の発現細胞種の同定を行う。その上で、セマフォリンの標的細胞種の同定を抗体を用いて行う予定である。
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| 次年度の研究費の使用計画 |
免疫組織学的解析に遅れがあり、一部試薬の購入に至らなかったため、残額を生じた。
本年度実行できなかった計画を次年度計画に組み入れて、研究を行う。
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