難治性炎症性疾患に対するPKCetaを分子標的とした新規治療法

2016 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 25460153
• 研究機関: 昭和大学
• 研究代表者: 大場 基 昭和大学, 腫瘍分子生物学研究所, 講師 (70297018)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: 分子標的治療 / 炎症 / PKC

研究実績の概要

PKCetaを分子標的として、難治性炎症疾患の軽快・治癒を目的とする新規治療法の開発を目指した。第1に、炎症性皮膚疾患に着目し、PKCetaの発現や酵素活性を阻害する核酸・ペプチド阻害剤の効果を検証した。アトピーモデルマウスNc/Ngaの背部及び外耳皮膚を対象として、レシチン様経皮核酸導入剤や皮膚浸透性ペプチドを用いて、PKCeta特異的siRNAやPKCeta偽基質ペプチドを導入し、その効果を複数の臨床的所見（掻痒行動、発赤・出血、浮腫、擦傷、痂皮形成）をスコア化することで評価した。その結果、昨年度までに、１）PKCeta siRNAによりアトピー様皮膚炎が軽快することを確認し、２）ヒトPKCetaの発現を特異的・著明に抑制するsiRNA配列を同定した。更に、PKCeta偽基質ペプチドに様々な修飾を施し、その抗炎症効果も検証した。
以上の成果を基に今年度は、全身性慢性炎症性疾患への応用を検討した。これは、PKCetaの活性を左右するSNPsが、脳梗塞・慢性関節リュウマチ・萎縮性胃炎の罹患率を上昇させることが示されているためである。特に、動脈硬化症への作用をApoEノックアウトマウス(ApoE KO)を用いて検討した。ヒトPKCeta siRNAを種々の導入試薬と共に尾静脈投与し、そのデリバリ効果・持続時間を検討した。その結果、特にコラーゲンベース試薬の効果が高いことが示された。また、PKCeta遺伝子を欠損による動脈硬化への影響を検討するために、PKCeta ノックアウトマウスとApoE KOとのダブルノックアウトマウスを作製し、血液学的・組織病理学的な解析を行った。

研究成果

• [雑誌論文] Distinct Afatinib Resistance Mechanisms Identified in Lung Adenocarcinoma Harboring an EGFR Mutation. (2017)
  • 著者名/発表者名: Yamaoka T, Ohmori T, Ohba M, Arata S, Murata Y, Kusumoto S, Ando K, Ishida H, Ohnishi T, Sasaki Y.
  • 雑誌名: Mol Cancer Res. 巻: in press ページ: in press
  • DOI: doi: 10.1158/1541-7786.MCR-16-0482
  • 査読あり
• [雑誌論文] Up-regulation of Syndecan-4 contributes to TGF-beta1-induced epithelial-mesenchymal transition in lung adenocarcinoma cells. (2016)
  • 著者名/発表者名: Toba-Ichihashi Y., Yamaoka T., Ohmori T. and Ohba M
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Reports. 巻: 5 ページ: 1-7
  • DOI: doi.org/10.1016/j.bbrep.2015.11.021
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] The acquired resistant mechanisms for sequential treatment of EGFR-TKI to Met-TKI/EGFR-TKI in a Met amplified EGFR-TKI resistant lung adenocarcinoma cells, harboring EGFR activating mutation. (2016)
  • 著者名/発表者名: 64.Yamaoka T., Ohmori T., Ohba M., Arata S., Kishino Y., Murata Y., Kusumoto S., Ishida H., Shirai T., Hirose T., Ohnishi T., and Sasaki Y.
  • 雑誌名: Mol. Cancer Ther. 巻: 15 ページ: 3040-3054
  • DOI: doi:10.1158/1535-7163.MCT-16-0313
  • 査読あり