| 研究課題/領域番号 |
25460195
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| 研究機関 | 東北薬科大学 |
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研究代表者 |
佐々木 崇光 東北薬科大学, 薬学部, 助教 (20382674)
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| 研究分担者 |
永田 清 東北薬科大学, 薬学部, 教授 (80189133)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2017-03-31
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| キーワード | iPS細胞 / CYP3A / レポーター遺伝子 / 薬物代謝学 |
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| 研究実績の概要 |
平成26年度は、National Cancer institute (NCI)/National Institutes of Health (NIH)のLaboratory of Human Carcinogenesisに海外研修へ行ったため、本研究を実施していない。しかしながら、この海外研修においては、肝がん細胞の幹様細胞の性質を解明する研究に従事し、本研究計画の推進と十分な成果を得るために有益な結果及び技術を習得した。
私は、海外研修中、肝がん細胞の幹様細胞において高発現しているαフェトプロテイン（AFP）や上皮細胞接着分子（EpCAM）の発現調節機構の検討を行った。その結果、クロマチンリモデリング等に関与する遺伝子ファミリーに属する遺伝子Xが、AFPの遺伝子発現調節に関与する可能性を見出した。我々が作製した肝分化iPS細胞においても、成熟肝細胞において発現量が低いAFPが高発現している。このような現象は、他の研究者においても報告されており、成熟性の高い肝分化iPS細胞の作製に至らない要因の一つである可能性がある。したがって、本研究計画に加えて、海外研修中の成果を利用し、より成熟性の高い肝分化iPS細胞を作製したいと考えている。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
平成26年度は、海外研修へ行ったため、本研究は遅れている。しかしながら、初年度に本研究を行う上で重要となる分泌型レポーター遺伝子安定発現用レンチウイルスの作製やiPS細胞の肝分化誘導効率を上昇させる因子等を同定していることから、今後、十分な成果を得ることができると考えられる。
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| 今後の研究の推進方策 |
平成27年度は、stable iPS細胞の樹立を継続するとともに肝分化誘導過程中のCYP3A4/CYP3A7発現パターンの再現を行う。RARRES2、SREBF1あるいはTHRSP発現アデノウイルス等を用いて、分化誘導過程中の導入時期や導入量等の検討に加え、細胞周期に着目した種々の化合物等も使用して、より正確に生体におけるCYP3A4/CYP3A7発現パターンを再現する。次に、CYP3A4/CYP3A7の上流領域に結合する転写因子及びその複合体の解析を行う。この結果あるいはその他の実験により得られた情報に基づき、生体におけるCYP3A4/CYP3A7発現パターンの再現性及び肝分化iPS細胞の薬物代謝活性等の機能性の向上が期待できる因子を同定し、iPS細胞の肝分化誘導過程中に導入し、その効果を検証する。さらに、海外研修中に得られたAFPの発現調節に関与する可能性のある遺伝子Xについても肝分化iPS細胞の成熟性に影響を及ぼすか検討する。
また、最終年度に補助事業期間延長承認申請を行う予定である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
平成26年度は、NCI/ NIHのLaboratory of Human Carcinohenesisに海外研修へ行ったため、本研究を実施していない。そのため、本年度分の予算を使用しなかった。
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| 次年度使用額の使用計画 |
平成27年度は、当初、平成26年度に計画していた研究を実行するため、本研究計画通りiPS細胞培養関連の試薬及びその他消耗品購入に当てることとする。主に、アデノウイルスを利用した遺伝子導入や細胞周期に影響を及ぼす化合物を用いたiPS細胞の肝分化誘導効率の向上、そして、生体におけるCYP3A4/CYP3A7発現パターンの再現性を行うことから、iPS細胞の培養及び肝分化誘導に関連した試薬を購入する予定である。
また、最終年度に補助事業期間延長承認申請を行う予定である。
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