| 研究課題/領域番号 |
25460198
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| 研究機関 | 昭和薬科大学 |
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研究代表者 |
清水 万紀子 昭和薬科大学, 薬学部, 講師 (90307075)
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| 研究分担者 |
山崎 浩史 昭和薬科大学, 薬学部, 教授 (30191274)
村山 典惠 昭和薬科大学, 薬学部, 講師 (90219949)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| キーワード | フラビン含有酸素添加酵素 / FMO3 / 薬物相互作用 |
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| 研究実績の概要 |
薬物酸化酵素フラビン含有酸素添加酵素3（FMO3）は第一相薬物代謝反応において、化学物質、食品由来成分および幅広い医薬品のＮ-およびＳ-酸化反応を触媒する重要な酵素である。FMO3は酵素機能に影響を与えるアミノ酸置換を伴う遺伝子変異が国内外で報告されている。近年、FMO3が代謝消失にかかわる医薬品が報告あるいは上市されている。しかし、FMO3が関与する併用薬による薬物相互作用の情報は充分ではない。本研究では、リコンビナント酵素を用いて、FMO3の典型的な指標反応であるベンジダミンN-酸化酵素活性に対して共存化合物の抑制効果を検討した。41種類の化合物のうち、トリメチルアミン、メチマゾール、イトプリド、トザセルチブが本反応を抑制した。そこで、ベンジダミン、トリメチルアミン、イトプリドおよびトザセルチブ N-酸化酵素活性ならびにメチマゾール、スリンダクスルフィド S-酸化酵素活性に対し、それぞれ共存薬物の抑制作用を評価した。共存薬物がもたらすFMO3指標薬物酸化酵素活性の抑制は、野生型と比較してFMO3遺伝子多型によって異なり、特にp.Arg205Cys変異体が触媒するスリンダクスルフィドおよびメチマゾール S-酸化酵素活性に対して他の共存薬物の阻害作用がより顕著に認められた。以上、FMO3遺伝子多型が本酵素の関わる医薬品代謝消失および薬物相互作用の個人差の原因となる可能性が推察された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
リコンビナントヒトFMO3酵素ならびにFMO3遺伝子変異をあらかじめ判定したヒト個別肝ミクロゾームを用いて併用薬物の酵素活性阻害定数 Ki値の算出を行い、薬物相互作用の可能性と遺伝子変異に伴う影響を推測できた。実験動物の肝ミクロゾームおよびFMO酵素を用いてFMO基質に対する酵素機能を明らかにできた。
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| 今後の研究の推進方策 |
ヒトFMO3の基質となりうる医薬品および化学物質を引き続き検索する。日本人におけるFMO3酵素活性に影響を与える遺伝子変異の解明のため、ボランティアの尿中トリメチルアミン濃度を測定する。同意書上の特記事項を精査し、併用薬物等の尿中トリメチルアミンへの影響を検討する。さらに、医薬品開発において汎用されている実験動物の肝ミクロゾームならびにリコンビナントFMO1およびFMO3酵素を用いて、ヒトFMO3酵素で検討した基質に対する酸素添加酵素活性および共存薬物による阻害作用を明らかにする。実験動物でのin vivo薬物相互作用の検討を行うため、薬物血中濃度測定系を検討する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
1万円以下の端数が出たので、次年度助成金と合わせて使用する。
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| 次年度使用額の使用計画 |
FMO3表現型解析および遺伝子型解析を進めるために、一般試薬、消耗品およびPCR用試薬ならびにDNAシークエンスが必要となる。サルなどの実験動物肝ミクロゾームおよびリコンビナント酵素を使用したin vitroでの相互作用解析のため、一般試薬および消耗品が必要となる。研究成果発表のため、学会参加費、論文校閲費および研究成果投稿費が必要となる。
26年度に4,558円の残金が発生したので、27年度請求額と合わせて執行する。使用計画には特に影響はない。
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