| 研究課題/領域番号 |
25460267
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| 研究機関 | 信州大学 |
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研究代表者 |
寺田 信生 信州大学, 学術研究院保健学系, 教授 (60293461)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| キーワード | 接着分子 / 膜骨格 / 蛋白複合体 / 細胞極性 |
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| 研究実績の概要 |
我々は跳躍伝道に関わる末梢神経系シュワン細胞のミエリンにあるシュミット・ランターマン切痕に膜骨格蛋白複合体プロテイン4.1G-MPP6-CADM4を見出して論文、総説として発表した(Springer Book)。この複合体の破綻は、シャルコー・マリー・ツース症候群の原因の一つとしても注目されている。
このシグナル蛋白で細胞膜直下で接着分子とも結合するMAGUKファミリーであるMPP6蛋白の細胞局在とその機能を明確にするために、比較的細胞極性が明瞭なマウス腸管の単層円柱上皮に着目して研究を進めた。
MPP6はマウス小腸で上皮細胞側面の細胞膜直下に局在することを免疫電子顕微鏡法で明らかにし、E-cadherinの接着帯に2重免疫染色により共局在していた。一方、タイト結合のZO-1との共局在は認めなかった。
既に我々はSLIで4.1GがMPP6の局在を規定することを見出したこと、また腸管単層円柱上皮にはプロテイン4.1Bが局在することを報告していたので、作製した4.1B欠損マウスを用いてMPP6の4.1Bの関与について検討した。野生型と比較して局在や蛋白発現に変化を認めなかったことから、腸管上皮ではMPP6に4.1Bは必須ではないことがわかった。
その一方で、膜骨格蛋白複合体を明らかにする目的で、免疫沈降法によって腸管上皮で他のMAGUKファミリーであるCASK蛋白がMPP6と結合することを明らかにし、今後これら蛋白の相互関係による複合体形成過程を明確にする必要がある。
以上のように上皮側面の細胞膜直下に局在する蛋白複合体を明らかにしたことで、さらにこれらの機能を個体レベルでの変化を含めて解析するために、上皮培養系やマウス遺伝子改変動物作製を開始して本課題を継続している。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
１）新たにマウス腸管でのMPP6の上皮細胞局在を明らかにして既に学会発表を行い、さらに現在英文論文を投稿中である。
２）この蛋白の遺伝子改変マウス作製に着手している。
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| 今後の研究の推進方策 |
１）遺伝子改変マウスの作製
個体レベルでの機能を明らかにする。
２）腸管培養系での機能解析
１）と合わせて、腸管組織形成における関連を検討する。
３）蛋白複合体の検索
細胞膜直下の膜骨格の観点から、接着蛋白やシグナル蛋白との機能連関を明らかにする。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
実際の購入価格に差額が生じたため。
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| 次年度使用額の使用計画 |
差額を含めて適切に次年度に使用する。
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