| 研究課題/領域番号 |
25460286
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 研究機関 | 滋賀医科大学 |
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研究代表者 |
尾松 万里子 滋賀医科大学, 医学部, 准教授 (80161397)
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| 研究分担者 |
松浦 博 滋賀医科大学, 医学部, 教授 (60238962)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| キーワード | ACMs / cardiomyocytes / cardiac ventricle / beating / fetal cardiac gene / ischemic tolerance |
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| 研究概要 |
心臓には，心筋細胞，内皮細胞，血管平滑筋細胞などに加え，cardiac progenitor cellsおよびside population cellsに分類される種々の幹細胞が存在することが明らかになり，これらの幹細胞を心筋細胞に分化させる方法が報告されている．申請者らは，ランゲンドルフ灌流による成体マウス心室筋細胞単離の最終過程において，遠心によって取り除かれた上清分画（心筋細胞を含まない小型細胞分画）を集めてmethylcellulose を含む半固形状培地中で培養したところ，3~5日後の接着細胞群の中に，枝分かれした形態に変化するとともに自動的に拍動する細胞が存在することを見出し，非定型心筋細胞（atypically-shaped cardiomyocytes , ACMs）として同定し，その生理的特徴を調べている．培養細胞としての性質を調べるだけではなく．心臓内での局在を検討するためにはACMsを特異的に認識するマーカータンパク質を探すことが必要であり，今回，Cellular Prion proteinがその有力は候補であることがわかった．
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
マウスから得られたACMsと心室筋細胞のRNAを抽出し，増幅した後，マイクロアレイ解析によってgene expression profileを調べたところ，ACMsにおいて増えている遺伝子より減少している遺伝子の方が多く，不完全な心筋細胞の一種であるACMsの形態的特徴を良く表していた．今回，ACMsを特異的に認識するマーカーとしての可能性のあるタンパク質として，Cellular Prion proteinを見出し，細胞表面マーカーとして有効であることを確認できた．
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| 今後の研究の推進方策 |
ACMsを特異的マーカーとしてのCellular Prion proteinおよび，心筋細胞の特異的タンパク質であるcardiac troponin Tの両方をマーカーとして，マウス心臓内におけるACMsの分布を検討する．
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| 次年度の研究費の使用計画 |
データ解析に日数がかかったため，当該年度に使用予定であった試薬を次年度に用いることにしたため．
次年度使用額と合わせ，種々の抗体を用いた免疫染色を行う．
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