| 研究課題/領域番号 |
25460303
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 研究機関 | 東京慈恵会医科大学 |
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研究代表者 |
山澤 徳志子 東京慈恵会医科大学, 医学部, 講師 (00282616)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| キーワード | リアノジン受容体 / カルシウム / 骨格筋 / 一酸化窒素 |
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| 研究概要 |
一酸化窒素（NO）によるCa上昇は、細胞内小胞体にあるリアノジン受容体を介するCa放出機構（NICR)によるものであり、これが神経細胞死に関与していることを明らかにした。本研究では、神経細胞と同様に神経型NO合成酵素とリアノジン受容体が共発現している骨格筋において、NOによるCa放出機構の生理的および病態生理的意義を解明する。
H25年度は、CaによるCa放出機構(CICR)が亢進している悪性高熱症発症患者のリアノジン受容体遺伝子変異におけるカルシウムシグナル機能の解析法を確立した。野生型リアノジン受容体から10種類の悪性高熱症発症患者変異遺伝子を作成してヒト胎児由来腎臓細胞を用いて安定発現細胞株を作成した。悪性高熱症変異にはCICR活性およびNICR活性が亢進する機能的変異とCICR活性およびNICR活性には影響を与えない変異があることが明らかになった。いくつかの悪性高熱症変異は野生型に比べて静止時のCa濃度が上昇したことより、リアノジン受容体のチャネル構造に影響を与え小胞体からカルシウムが漏れやすくなっている可能性が示唆された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
悪性高熱症発症患者のリアノジン受容体遺伝子変異におけるNOによるCa放出機構の研究は、論文投稿の可能性がある状態になので、できるだけ早急に論文投稿に向けて進める。
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| 今後の研究の推進方策 |
カルシウムシグナル機能解析結果を踏まえて、細胞内Ca濃度およびを小胞体内腔Ca濃度を測定して野生型と悪性高熱症発症患者の変異体とで比較して解析する。
カルシウムシグナル亢進のメカニズムとしてリアノジン受容体チャネル構造の変化が考えられるので、カルシウムシグナル機能解析から得られた結果に分子動力学を用いたシュミレーション解析を加えて機能的変異を同定する。
できるだけ早急に論文投稿する予定である。
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| 次年度の研究費の使用計画 |
学会発表のための旅費は別の研究費で支出した。
細胞内Ca濃度と小胞体内腔Ca濃度の同時測定を行うため、励起波長が複数必要になる。このため、波長に合わせた蛍光フィルターを購入する。学会発表における国内旅費として支出する。また、論文作成の最終段階なので、英文校閲料に使用する。
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