| 研究課題/領域番号 |
25460337
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 研究機関 | 熊本大学 |
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研究代表者 |
頼仲 方一 熊本大学, 生命科学研究部, 助教 (90244110)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| キーワード | TNNI3K / モノクローナル抗体 / 虚血性心疾患 / 新型診断薬の開発 / ELISA実験 / ゲノム創薬 |
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| 研究概要 |
TNNI3Kは心筋特異的に発現するMAPキナーゼである。本研究は、抗ヒトTNNI3Kモノクローナル抗体を用い通常のELISA 法及び金コロイド銀増幅法を駆使して、虚血性心疾患に対する特異性の高い診断薬開発を行い、心筋虚血疾患の予防と治療に資することを目的とする。
本年度には、主にTNNI3Kリコンビナント蛋白を用いて抗TNNI3Kモノクローナル抗体を作製した。いままでは10個免疫グロブリンクラスを決定したが、これらの免疫グロブリンクラスを利用して、高親和性のTNNI3K特異的モノクローン抗体を作製し、臨床的に応用できる高感度の確定診断システムを開発する可能性を見えられる。さらに、得られた抗ヒトTNNI3Kモノクローナル抗体を用いて、ELISA法によるTNNI3K診断キットを作成し、 ELISA方法で異なる濃度のTNNI3K 抗原の存在下に抗TNNI3Kモノクローナル抗体の反応を測定し、その抗体の反応曲線を測定した。一方、共同研究者の関連病院で、その病院を訪問し、我々が作った抗TNNI3Kモノクローン抗体を持って行って、ELISA法で健常者、急性心筋虚血患者（急性心筋梗塞、急性冠状動脈症状群）の血液サンプルをELISA法で検査と解析した。その結果、健康対照群と比べると、急性心筋虚血患者の血中TNNI3K濃度は有意に上昇したことが示唆された。
抗TNNI3Kモノクローナル抗体を作成する目的は、特異性、感受性の高い心筋梗塞疾患などの早期診断キットを作成し、その早期診断薬を開発することである。我々で開発した抗TNNI3Kモノクローン抗体は、心筋虚血や心筋梗塞など虚血性心疾患の診断に対して、その感受性も、特異性も高いですが、今後の新規心疾患診断薬を開発する道へ行うと考えられた。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
最初の実験計画中に、一つ達成目標が「：中国協力研究者の中国医学科学院医学生物研究所CHU Jiayou教授のチームと共同研究を行い、ELISA法によるTNNI3K診断キットを用いた、急性心筋梗塞を含む心筋虚血患者300例の血中TNNI3K濃度を調べる。（研究代表者、研究分担者、研究協力者、中国の研究協力者 担当）」。CHU Jiayou教授が定年のため、共同研究者として不可能ことになったが、それをお変わり、平成25年10月の初め、中国幹南医学院の王伯群教授（医学院副学長兼任）及び王小萍教授（附属病院心臓内科）の好意で、共同研究のことを同意でしてきたが、やや遅れたけれとも、彼らのチームの共同努力で本年度には200例サンプルを揃ったことと共にELISA実験を行う、実験結果を分析した。
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| 今後の研究の推進方策 |
平成25年度に、東京で開催された日本応用薬理学会、福岡で開催された日本薬理学会西南部会およびダラスで開催された米国心臓学会の発表会において、いろいろ企業は我々の抗TNNI3Kポリクローナル抗体を用いた血中TNNI3K濃度の経時的な変化の研究結果を大変興味があるが、相談した結果はTNNI3Kモノクローナル抗体ができたら、企業との共同研究や測定の企業化をする可能性が高くなれることが示唆された。今後、TNNI3Kモノクローナル抗体を用いて、現在のELISA法、および開発中のTNNI3K-金コロイド銀増幅型検査チップの作製と調製とともに、出来るだけ多くの血液サンプルをテストし、新しい心疾患の有効な診断薬を開発する道へ推進するように行なうと考えされていた。
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