| 研究課題/領域番号 |
25460368
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| 研究機関 | 奈良先端科学技術大学院大学 |
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研究代表者 |
松田 永照 奈良先端科学技術大学院大学, バイオサイエンス研究科, 助教 (00335481)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2017-03-31
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| キーワード | ES細胞の分化 / メチル化DNA結合タンパク質 / ES細胞 / 心筋細胞 / Brachyury（T） / Mesp1 / CIBZ / Znフィンガー |
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| 研究実績の概要 |
申請者らは、Znフィンガー型のメチル化DNA結合タンパク質をコードするCIBZ遺伝子を欠損したマウス胚性幹細胞株を樹立した。この細胞株を分化誘導させた場合、心筋細胞への分化促進が観察され、心筋細胞の発生や分化に関わる転写因子群、特に中胚葉のマーカー遺伝子であるBrachyury（T）と心筋分化のマスター遺伝子であるMesp1の発現上昇が確認された。その一方で、CIBZを過剰発現するES細胞の場合、心筋細胞への分化が抑制され、TやMesp1の発現上昇が抑制された。
ES細胞において、CIBZがTとMesp1のプロモーター領域に結合することがクロマチン免疫沈降法によって明らかにされた。レポーターの結果より、CIBZ はTとMesp1のプロモーターを抑制することことが分かった。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
欧州条件変異マウス作成プログラムより入手したCre-loxPシステムを用いた条件付きベクターでCIBZのflox-neo/+マウスを作製した。このマウスとCreを全身に発現するトランスジェニックマウスと交配し、CIBZの△flox/+ マウスの作製を試みたが、生まれたマウスの中でCIBZヘテロ接合体マウスを同定できなかったことから、CIBZハプロ不全による胎生致死であることが示唆された。
2015年７月～2016年３月、当大学の動物遺伝子実験施設において、空調設備などの工事行われたため、動物実験が遅れた。
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| 今後の研究の推進方策 |
１，CIBZがES細胞の心筋への分化制御機構をさらに明らかにする。
２，CIBZのflox/+ マウスと全身に発現するCreマウスとの交配により、CIBZの△flox/+ マウスによる胎生致死を検証する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
2015年７月～2016年３月、当大学の動物遺伝子実験施設において、空調設備などの工事行われたため、動物実験が遅れた。
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| 次年度使用額の使用計画 |
細胞やDNA・RNA関連試薬・器具、マウス関連（飼育など）。
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