| 研究課題/領域番号 |
25460474
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 研究機関 | 高知大学 |
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研究代表者 |
長沼 誠二 高知大学, 教育研究部医療学系, 助教 (50452123)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| キーワード | 食道癌 / Notchシグナリング / レーザーマイクロダイセクション / 癌浸潤 / 予後因子 |
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| 研究概要 |
1. 食道癌の手術標本を用いて病理組織学的、免疫組織化学的検討を行った。通常のヘマトキシリン・エオジン染色(H/E)により、食道癌浸潤部における癌細胞の形態変化、特にEMT様変化の有無・程度を検討し、更にNotch1の免疫染色により、同部におけるNotchシグナルの活性化を示唆する核染色の有無・程度を検討し、さらに中長期予後の判明している症例に関して予後との相関性を統計処理にて検討した。
それにより、ある特定のNotch1蛋白の組織発現パターンを示した症例では有意に生命予後が不良であることが統計的に明らかになった。
2. 食道空腸吻合を施したラットの食道をサンプリングし、その組織形態を検討したところ、食道炎、異型性上皮、バレット上皮（化生上皮）、腺癌、扁平上皮癌という多彩な組織像をとる個体がみられた。このサンプルから凍結切片を作成し、レーザーマイクロダイセクション法によって各々の組織型をとる部分からそれぞれ組織を採取し、tRNAを抽出した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
事情により採択後に所属機関の変更があり、研究環境の変化による新たな環境の整備に期間を要し、特に本研究に必要な機器が使用できなくなり他施設に出張して実験することを余儀なくされたこともあり、当初の予定よりいくぶん遅れているのが現状です。
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| 今後の研究の推進方策 |
上項にあげた不都合についても、協同研究者の施設と協力することにより解決したため、今後は当初の予定通りの研究推進が可能と考えます。
まずはRNAマイクロアレイにて食道炎、化生、異型性、浸潤癌の各フェーズにおける遺伝子発現の差異を検討して、その後のin vitroの実験につなげていきます。
また、臨床標本による組織学的所見と予後の相関に関しては、統計学的に有意差が確認されており、このデータを基にした成果発表も期間内に可能と考えます。
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| 次年度の研究費の使用計画 |
研究進捗の若干の遅延のため、最も費用を要するRNAマイクロアレイおよびその後のreal time PCR等の実験を当該年度中に行うことができず、翌年度に持ち越してしまったため。
外注となるRNAマイクロアレイに関してサンプルは調整済みであり、次年度中に確実に使用することになります。その後の諸実験に関しては先のアレイをうけて流動的に施行することになると思われますが、計画通りにいけばreal time PCRや特殊細胞培養など、比較的コストのかかる実験が必要になってきますので、無駄のないよう有効に使用してまいります。
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