| 研究課題/領域番号 |
25460523
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 研究機関 | 産業医科大学 |
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研究代表者 |
長田 良雄 産業医科大学, 医学部, 准教授 (80282515)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| キーワード | 自己免疫疾患 / 寄生虫 / 免疫修飾 / 住血吸虫 / 糖尿病 |
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| 研究概要 |
本年度の主な成果：住血吸虫および腸管寄生線虫（H.polygyrus）の1型糖尿病（T1D）に対する抑制機構の解析
[実験結果] 一部の寄生蠕虫はT1Dを抑制すること、およびTh2偏位とともにM2マクロファージを誘導することが知られている。また、M2マクロファージはNODマウスにおける自然発症糖尿病を抑制することが報告されており、本実験系(STZ誘発T1D)においても糖尿病抑制性エフェクターになっている可能性が高い。実際に、上記２種の蠕虫について現在までに感染マウス膵リンパ節（PLN）におけるTh2サイトカイン遺伝子とM2マーカー遺伝子の発現上昇を確認している。一方で、いずれの虫の血糖値上昇抑制作用においても（Th2を誘導する）STAT6シグナルが必須ではないことが判明している。そこでSTAT6非存在下でもM2型のマクロファージ活性化が起きているか確認するため、マンソン住血吸虫（Sm）またはH. polygyrus（Hp）を感染させたSTAT6KOマウスのPLNにおけるM2マーカー発現をリアルタイムPCRで解析した。その結果、M2マーカーのうちArg-1, Retnlaの２つの遺伝子は野生型（WT）マウスに比べ発現上昇が抑制されていたが、Ym-1遺伝子はWTと同様の発現上昇が認められた。このことから、蠕虫感染があるとSTAT6KOマウスではWTマウスと異なるタイプ（Ym-1+）のM2様マクロファージが誘導されて、抗糖尿病効果を担っている可能性が示唆された。
[意義] 抗糖尿病効果をもつ寄生蠕虫やそのエフェクター分子を探索する際には、Th2応答誘導能ではなくM2マクロファージ誘導能を指標にするのが望ましいこと、その際には複数のM2マーカーの解析が必要であることなどが推測されるが、抗糖尿病エフェクター細胞と機能分子を確定するためには今後のさらなる検討が必要である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
概要に記載した実験に関しては実験系が確立済みであり、おおむね予定通りに進行している。特殊なマウスを必要とする実験に関してはマウスの準備（二重KOマウス作成・繁殖および適切な系統への戻し交配・繁殖）が若干遅れていたが、いったん準備できれば実験の遂行に支障はないと思われる。
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| 今後の研究の推進方策 |
低病原性寄生蠕虫を含むさまざまな寄生虫の糖尿病抑制作用とM2マクロファージ誘導能の解析および細胞移入実験などを通じて、抑制性エフェクターとしてのM2マクロファージの可能性について検証する。また、新たに作成したSTAT6/IL-10二重KOマウスを用いて、本抑制作用におけるIL-4/IL-13とIL-10の冗長的関与の可能性について検討する。関節炎・EAEについては、縮小条虫やその抽出物の効果を検討し、効果が見られたものに関してはKOマウスを用いてサイトカインの関与を検証する。
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| 次年度の研究費の使用計画 |
研究全体としてはおおむね順調であるが、KOマウスの準備（STAT6/IL-10二重KOマウスの作成やSTAT6KOマウスおよびIL-10KOマウスの関節炎発症系統（DBA/1）への戻し交配など）が若干遅れたため、その部分の実験が手つかずであり研究費使用額が予定よりも少なかった。
現在STAT6/IL-10二重KOマウス作成自体は終了しており、繁殖により十分な数が得られ次第予定していた実験に取り掛かる。またDBA/1への戻し交配も終了しており、同様に繁殖を待って実験に供する。まずはマウスの実験を優先し、ラットを用いた実験は飼育スペースを考慮しながら適宜開始する。繰越し分の研究費はWTマウスやラットの購入費、および飼育に関わる研究補助員の人件費等に使用する予定である。
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