アトピー性皮膚炎感染黄色ブドウ球菌の病原性基盤

2015 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 25460533
• 研究機関: 広島大学
• 研究代表者: 菅井 基行 広島大学, 医歯薬保健学研究院(歯), 教授 (10201568)
• 研究分担者: 久恒 順三 広島大学, 医歯薬保健学研究院(歯), 助教 (40513180)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• キーワード: アトピー性皮膚炎 / 黄色ブドウ球菌

研究実績の概要

アトピー性皮膚炎から分離された株TF3378のコンプリートゲノムシークエンスを決定し、すでにドラフト配列を読んだ複数株と合わせてゲノムの比較解析を行った。その結果、アトピー性皮膚炎由来株TF3378に特徴的でかつアトピー性皮膚炎由来株に共通して見られる遺伝子群に注目し、その中からスーパー抗原様タンパクSEYを含めて複数の特有遺伝子を同定した。SEYについては組換え体を作製し、ヘアレスマウス腹腔内へ投与した結果、毛細血管拡張の可能性、うぶ毛の脱毛している所見が見られた。このことからSEYはなんらかの病態生理学的活性を有する可能性が示唆された。またアトピー性皮膚炎由来株TF3378を用いて、遺伝子相同組換えによる変異株作成を試みるため、大腸菌－黄色ブドウ球菌シャトルベクターを用いて形質転換を試みたが失敗した。そこで遺伝子改変法の開発を試み、CRISPR遺伝子破壊プラスミドシステムを構築した。構築したCRISPR遺伝子破壊プラスミドを用いてicaA破壊株を作製した。得られたicaA破壊株を用いて、フィラグリン欠損マウスへの菌固着性について検討した結果、菌固着性に変化がない（icaA破壊株もフィラグリン欠損マウスへ強い固着性を示した）ことがわかった。アトピー性皮膚炎患者皮膚からはほぼ100%の確率で黄色ブドウ球菌が分離される。菌が皮膚のどの部分に定着しているのかは未だ明らかにされていない。そこでsarA P1プロモーターとsodのSD配列を用いたoptimized plasmidを作製し、アトピー性皮膚炎由来株TF3378でGFP発現株を作製した。

研究成果

• [雑誌論文] C55 bacteriocin produced by ETB-plasmid positive Staphylococcus aureus strains is a key factor for competition with S aureus strains (2016)
  • 著者名/発表者名: Miki Kawada-Matsuo, Fariha Shammi, Yuichi Oogai, Norifumi Nakamura, Motoyuki Sugai and Hitoshi Komatsuzawa
  • 雑誌名: MIcrobiology and Immunology 巻: 60 ページ: 139-147
  • DOI: 10.1111/1348-0421.12360
  • 査読あり
• [雑誌論文] Inhibitory effects of antibiofilm compound 1 against Staphylococcus aureus biofilms (2016)
  • 著者名/発表者名: Looniva Shrestha, Shizuo Kayama, Michiko Sasaki, Fuminori Kato, Junzo Hisatsune, Keiko Tsuruda, Kazuhisa Koizumi, Nobuyuki Tatsukawa, Liansheng Yu, Kei Takeda, Motoyuki Sugai
  • 雑誌名: Microbiology and Immunology 巻: 60 ページ: 148-159
  • DOI: 10.1111/1348-0421.12359
  • 査読あり