IgM受容体による液性免疫の促進と自己免疫の回避の分子機構の解明

2013 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 25460604
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 王 継揚 東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 講師 (80231041)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• キーワード: IgM受容体 / Bリンパ球 / 液性免疫

研究概要

本年度はIgM受容体（FcμR）がB細胞の生存を促進する分子機構について解析を行い、以下の結果が得られた。１）FcμRとB細胞受容体（BCR）が物理的に相互作用することを明らかにした。脾臓B細胞を可溶化し、抗IgM抗体を用いてBCRを免疫沈降した後、FcμRの共沈をウエスタンブロットで確認できた。逆に、抗FcμR抗体を用いてFcμRを免疫沈降した後、BCR及びBCRに会合するIgαの共沈をウエスタンブロットで確認できた。２）FcμR架橋によるBCRシグナルへの影響を解析した。BCR架橋により、古典的NF-κB活性化経路の指標であるIκBのリン酸化、及び非典型的活性化経路の指標であるp52の生成、さらにB細胞の生存を促進するBCL-xLの発現が誘導されることが知られている。そこで、BCR架橋に加え、FcμRを同時に架橋したところ、IκBのリン酸化には影響がなかったが、p52の生成が促進され、さらに、BCL-xL蛋白の発現が上昇することを見出した。興味深いことに、BCR架橋をせずに、FcμRのみ架橋した場合、IκBのリン酸化、p52の生成及びBCL-xL蛋白の発現上昇のいずれも誘導されなかった。即ち、FcμRは、それ自身単独ではNF-κB経路を活性化できないが、BCR刺激によって誘導される非典型的NF-κBの活性化を促進することが判明した。これらの結果から、FcμRはBCRと会合することにより、抗原刺激を受けたB細胞の活性化を特異的に促進できることが示された。また、FcμRと補体受容体（CD21）の役割分担を解明するために、FcμRとCD21の二重欠損マウスの樹立を進めている。さらに、FcμRが自己反応性B細胞のアナジー誘導に果たす役割を解析するために、FcμR欠損とsHel/Hel-Igマウスの掛け合わせマウスの樹立も進めている。

現在までの達成度 (区分)

1: 当初の計画以上に進展している

理由

計画した実験は全て予定通りに実施され、FcμRがB細胞の生存を促進するメカニズムを解明した。

今後の研究の推進方策

今後は学術研究助成金の研究計画に従い、FcμRとCD21の二重欠損マウスを用いて、液性免疫の制御におけるFcμRとCD21の役割分担を解明する。さらに、FcμR欠損とsHel/Hel-Igマウスの掛け合わせマウスを用いて、FcμRが自己反応性B細胞のアナジー誘導に果たす役割を解析する。

次年度の研究費の使用計画

平成２６年度は２種類の掛け合わせマウスの解析を行う予定で、多額なマウス飼育費及び解析費用が必要なため、平成２５年度での実験費用を最小限に抑えた。
マウス飼育費、免疫応答の実験費用、自己免疫疾患の解析費用など

研究成果

• [雑誌論文] A role for CMTM7 in BCR expression and survival in B-1a but not B-2 cells (2014)
  • 著者名/発表者名: Zhang, Y., Wang, J.-Y. and Han, W.
  • 雑誌名: Int. Immunol. 巻: 26 ページ: 47-57
  • DOI: 10.1093/intimm/dxt042
  • 査読あり
• [雑誌論文] Complement-activating IgM enhances the humoral but not the T cell immune response in mice (2013)
  • 著者名/発表者名: Ding, Z., Bergman, A., Rutemark, C., Ouchida, R., Ohno, H., Wang, J.-Y. and Heyman, B.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 8 ページ: e81299
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0081299
  • 査読あり
• [雑誌論文] FcμR (Toso/Faim3) is not an inhibitor of Fas-mediated cell death in mouse T and B cells (2013)
  • 著者名/発表者名: Ouchida, R., Mori, H., Ohno, H. and Wang, J.-Y.
  • 雑誌名: Blood 巻: 121 ページ: 2368-2370
  • DOI: 10.1182/blood-2012-12-470906
  • 査読あり
• [雑誌論文] High levels of AID cause strand bias of mutations at A versus T in Burkitt's lymphoma cells (2013)
  • 著者名/発表者名: Kano, C. and Wang, J.-Y.
  • 雑誌名: Mol. Immunol. 巻: 54 ページ: 397-402
  • DOI: 10.1016/j.molimm.2013.01.005
  • 査読あり
• [雑誌論文] ADAR1 protein induces adenosine-targeted DNA mutations in senescent Bcl6 gene-deficient cells (2013)
  • 著者名/発表者名: Tsuruoka, N., Arima, M., Yoshida, N., Okada, S., Sakamoto, A., Hatano, M., Satake, H., Arguni, E., Wang, J.-Y., Yang, J.H., Nishikura, K., Sekiya, S., Shozu, M. and Tokuhisa, T.
  • 雑誌名: J. Biol. Chem. 巻: 288 ページ: 826-836
  • DOI: 10.1074/jbc.M112.365718
  • 査読あり
• [学会発表] The IgM Fc receptor positively regulates B cell survival and humoral immune responses (2013)
  • 著者名/発表者名: 王 継揚
  • 学会等名: BcellNET Meeting
  • 発表場所: Uppsala, Sweden
  • 年月日: 20131014-20131015
  • 招待講演