| 研究課題/領域番号 |
25460650
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| 研究機関 | 長崎大学 |
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研究代表者 |
塚元 和弘 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(薬学系), 教授 (30253305)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| キーワード | うつ病 / 抗うつ薬 / 薬剤応答性遺伝子 / うつ病の病因論 / プロ炎症性サイトカイン / 活性酸素種 / ゲノム創薬 / 遺伝子診断 |
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| 研究実績の概要 |
うつ病治療の第一選択薬である第2世代抗うつ薬(SSRI/SNRI)の治療効果には個人差が認められる。同剤の単剤治療開始2ヶ月後の治療効果は約60%である。この個人差を規定している薬剤応答性遺伝子を同定するために，平成26年度では，神経炎症や神経可塑性に関連する27個の候補遺伝子に着目し，同遺伝子内の計113個の一塩基多型を症例-対照研究法で解析した。本研究に同意したうつ病患者82名を単独治療開始2ヶ月後の治療効果の有無で治療感受性群と治療抵抗群に分けた。
4つの治療抵抗性遺伝子を同定した。SSRI単独治療において，IL1の受容体IL1R1のrs949963でA/A遺伝子型を持つ患者は約8.3倍，神経栄養因子GDNFの受容体RETのrs2075912でT/CあるいはC/C遺伝子型を持つ患者は約5.9倍，活性酸素の分解酵素SOD1のrs1041740でC/C遺伝子型を持つ患者は約6.3倍，同遺伝子のrs2070424でG/G遺伝子型を持つ患者は約4.8倍治療抵抗性を示した。一方，SNRI単独治療において，IL6の受容体IL6Rのrs6427658でC/C遺伝子型を持つ患者は約10倍治療抵抗性を示した。
現在までに治療効果と相関した9つの一塩基多型に対し，Genevar databaseとHaploReg v3を用いたin silico解析の結果，2つの機能している可能性の高い一塩基多型を同定した（TNFRSF1Aのrs4149577とRETのrs2075912）。これらの一塩基多型を発現ベクターに組み込み，mRNAとタンパク質の発現量を比較し，下流の細胞内シグナル伝達経路の活性化の有無を検証している。
今後，同定した遺伝子の機能解析から新しい病態を解明して新規治療薬の標的分子を同定する。さらに，相関した一塩基多型をバイオマーカーに用いて遺伝子診断法を開発し，コホート研究を行う。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
52個の候補遺伝子解析の計画に対して，昨年度と今年度で計47個の遺伝子解析（203個の一塩基多型）を終了してあと5つの候補遺伝子を残した。遺伝子解析に関してはおおよそ予定通りの進捗状況であった。しかし，解析対象の患者数は伸びなかった。今年度さらに34名のうつ病患者の同意を得るも，合計で148名となり予定より少なかった。外来患者を対象としたため，途中で来院しなくなりフォローできなくなった患者が続出して対象患者が減少した。最終的に解析できる患者数が106名になったことは反省材料の一つである。但し，統計解析できる最低限の患者数は確保できた。
また，治療効果判定が治療開始2ヶ月後の解析しかできなかった。上述したとおり，同意を得ても外来治療の途中からフォローできなくなった患者が続出したため，うつ病患者の長期予後（治療開始1年後）の治療結果が出た患者が極端に少なく，統計解析ができなかった。
但し，今年度解析した27個の候補遺伝子のうち，4つの治療抵抗性遺伝子を同定できた。プロ炎症サイトカイン受容体(IL1R1/IL6R)や神経栄養因子受容体(RET)が治療効果に関与していたことは，薬力学上の宿主側因子として受容体に着目した点は正解であった。また，もう一つの視点である活性酸素種の生成と分解に関わる遺伝子群で分解酵素(SOD1)が治療効果に関与していることを明らかにしたことは評価できる。これらの受容体や分解酵素が第2世代抗うつ薬(SSRI/SNRI)の薬理作用に関与する可能性を示すもので，新たな治療薬の標的分子となり，新規治療薬の開発が期待できる。
現在までに同定した一塩基多型に対してin silico解析を行った結果，2つの機能している可能性の高い一塩基多型を同定した。これらを発現ベクターへ組み込み，一塩基多型による遺伝子発現の変化や下流へのシグナル伝達の影響を検証している。
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| 今後の研究の推進方策 |
(1) 来年度が研究の最終年度であるため，連携研究者および研究協力者と協力して，本研究に同意したうつ病患者はすべてコホート研究の対象者とする。研究計画書通りに50名の同意をめざす。
(2) 残り5個の候補遺伝子の多型解析を継続し，治療感受性あるいは治療抵抗性遺伝子を同定する。
(3) 52個の候補遺伝子の解析が終わったあとに，治療効果と相関したすべての治療感受性遺伝子あるいは治療抵抗性遺伝子の一塩基多型がお互いに独立して治療効果や治療抵抗性に寄与しているかを多変量解析で検証する。続いて，独立していた一塩基多型を複数組み合わせて遺伝子診断を行い，治療効果あるいは治療抵抗性を予測できる遺伝子診断法を開発する。その時の相対的危険度をオッズ比で表す。P値が低く，オッズ比と陽性的中率と特異度が高い遺伝子診断法となるように組み合わせる。
(4) 新規に開発した遺伝子診断法を用いて，50例の新規うつ病患者を対象にコホート研究を行い，2ヶ月後の治療効果をエンドポイントに遺伝子診断法の有用性を検証し，個別化治療に応用する。
(5) 今後，治療効果と相関した治療感受性遺伝子あるいは治療抵抗性遺伝子の一塩基多型に対して，Genevar databaseとHaploReg v3を用いてin silico解析を行う。機能している可能性の高い一塩基多型を発現ベクターに組み込み，mRNAとタンパク質の発現量を比較し，下流の細胞内シグナル伝達経路の活性化の有無も検証する。解明した遺伝子機能とシグナル伝達経路から治療感受性や治療抵抗性の病態の分子機序を解明する。同時に，新しい病態からゲノム創薬（分子標的治療薬）につながる標的分子を同定する。
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| 備考 |
論文発表後にWebで研究成果を公開する予定である。
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