| 研究課題/領域番号 |
25460691
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 研究機関 | 長崎大学 |
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研究代表者 |
中村 洋一 長崎大学, 医歯(薬)学総合研究科, 講師 (20432974)
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| 研究分担者 |
長島 聖二 長崎大学, 大学病院, 助教 (00646672)
福田 実 長崎大学, 大学病院, 助教 (50388930)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| キーワード | 個別化医療 / 肺癌化学療法 |
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| 研究概要 |
現在、研究計画が長崎大学病院倫理委員会を通過したため、計画に従って超音波気管支鏡を用いて進行非小細胞肺癌症例より検体採取を行っている。検体は現在までで約20名程から採取できている。検体採取に際して臨床的に特に大きな問題は生じておらず、研究目的の検体を安全に採取することができている。また、検体採取については患者からの文書による同意を得てから行っている。しかし、現時点で症例の集積が予想より若干遅れている。解析系の立ち上げについては、RNA発現をRT-PCRを用いて定量化する作業を先行して行っている。超音波気管支鏡にて腫瘍に対するinsideが確認され、同部位より得られた未固定検体に対してRNeasy Plus Mini Kitを用いてtotal RNAを抽出、同 100ng よりHigh Capacity cDNA Reverse Transcription Kitを用いてcDNAの合成を行ない、10ng RNA相当のcDNAよりPlatinum qPCR Super Mixを用いてTaqMan法により解析対象項目（ERCC1など）とACTBのRT-PCRを行う。細胞株を用いた前臨床研究および過去の臨床試験の報告などより、ERCC1に対しては、⊿Ct=平均Ct(ERCC1)－平均Ct(ACTB),相対定量値=2-⊿Ctにおいて⊿Ct=6.5をカットオフ値として、6.5以上をプラチナ製剤耐性の可能性がある症例として対応する予定としている。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
症例集積のペースが予想より多少遅れているため。RT-PCRによるRNA定量の系は順調に立ち上がっている。
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| 今後の研究の推進方策 |
症例集積のペースアップを図っていく。他の解析系についても順次立ち上げていく予定である。DNA解析については症例集積終了後に一括して解析する予定であり、その時点で測定系の立ち上げを図る予定である。
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| 次年度の研究費の使用計画 |
初年度の症例集積が若干芳しくなかったため、RNAに関する網羅的解析に移行できなかった。
検体数がある程度蓄積した段階で網羅解析に移行する予定。解析開始となれば予算の執行が順調に行われることが予想される。DNA解析については症例集積終了後に一括して解析する予定である。
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