| 研究課題/領域番号 |
25460697
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| 研究機関 | 自治医科大学 |
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研究代表者 |
金井 孝裕 自治医科大学, 医学部, 講師 (00398504)
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| 研究分担者 |
小高 淳 自治医科大学, 医学部, 講師 (70382885)
青柳 順 自治医科大学, 医学部, 助教 (80438639)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| キーワード | CD4+T細胞 |
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| 研究実績の概要 |
CD4＋T細胞は、小児特発性ステロイド感受性ネフローゼ症候群や、川崎病の病態で重要な役割を果たしている。 そして、CD4＋T細胞は、転写因子STAT5Bにより、その遺伝子発現制御をうけることで、免疫機能の一部を発揮している。
ヒトSTAT5には、92%の相同性を持つSTAT5AとSTAT5Bの２分子が存在する。これらは、その構造類似性から多くの重複する作用を持つ。一方、STAT5B欠損患者の報告は、STAT5Bが独自の機能を持つことを明らかにした。ヒトにおいては、STAT5Bのみが、1)CD4+T細胞の増殖、2)制御性T細胞(CD4+CD25+FOXP3+T cell)の活性化、の作用を持つことが明らかとなった。
昨年度の研究成果に引き続き、共役因子候補タンパク質の検出を続けた。 エドマン法、並びに、質量分析法にて行った。 しかし、予想に反して、二つの手法で、異なる結果を得た。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
これまでに、ヒトCD4+T細胞を用いて、STAT5Bに対する共役因子候補タンパク質を、同定することができたが、検査手法を変えると、異なる結果を得た。この理由を、現時点では特定できていないため、進捗状況を、「やや遅れている」と、評価した。
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| 今後の研究の推進方策 |
初めに、なぜ二つの実験手法により、異なる結果を得たのかを検証する。つまり、採用した実験系で、検出されるべき共役タンパク質が、複数存在するのか、または、CD4＋T細胞のheterogeneityを反映しているのか、を、確認する。
その後、同定したタンパク質の遺伝子をヒトCD4＋T細胞上でsiRNA法によりノックダウンし、STAT5Bにより特異的制御を受ける遺伝子の発現量をq-PCR法にて測定し、コントロールと比較する。
上記手法により、本候補タンパク質の、共役因子としての働きを確認する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
実験結果が十分でなく、予定した次のステップに進めなかったため。
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| 次年度使用額の使用計画 |
まず、異なる実験結果の原因を突き止める。その後、これまでの実験計画に従って、実験を進める。
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