| 研究課題/領域番号 |
25460731
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 研究機関 | 兵庫医療大学 |
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研究代表者 |
山本 悟史 兵庫医療大学, 薬学部, 教授 (60220464)
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| 研究分担者 |
田中 康一 兵庫医療大学, 薬学部, 助教 (30274848)
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| 研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| キーワード | 神経因性疼痛 / 脊髄後根神経節 / K+チャネル / 熱 / ATP / ATP受容体 |
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| 研究概要 |
目的：「末梢神経傷害が交感神経節後細胞の発芽を誘起し，その軸索が脊髄後根神経節神経細胞（DRG神経細胞）に到達している」という報告がある．我々は，交感神経から放出されるノルアドレナリン（NA）が新規Kチャネル（Kheatチャネル）を抑制することを報告しており，またNAはDRG神経細胞からATPを放出させることが示されている．本研究では，「ATPがP2Y受容体を介してKheatチャネルやTRPV1受容体に作用し，神経因性疼痛の発生要因になっている」と仮説を立て，その可能性について検討する．本年度は，「ATPが，P2Y受容体を介してKheatチャネルを抑制し，DRG神経細胞の興奮性を亢進させる」ということについて検証する．
方法： パッチクランプ法を使用してDRG神経細胞から膜電流記録を行い： １．TRPV1受容体阻害薬を用いてTRPV1受容体電流（ITRPV1）を抑制した状態において，熱刺激によってIKheatのみを記録できる条件を決定する．２．ATPの作用によってP2Y受容体を介してIKheatが抑制されることを確認する，３．各種阻害薬を用いて，２．の抑制作用がどのATP受容体サブタイプを介したものか，どの蛋白キナーゼを介したものか，を調べる。
結果：上記方法で得られた結果は次の通り：１．DRG神経細胞に熱刺激を加えると，３種類の電流（IKheat，ITRPV1，IKheat + ITRPV1）が発生した．その中でもIKheat + ITRPV1のタイプが最も多かった．現在，TRPV1受容体阻害薬を用いて， IKheatのみを記録できる条件を検索している．２．３．については未実施．
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
熱刺激によって活性化されるKheatチャネル電流（IKheat）に対するATPの作用を調べるためには，熱刺激によって同時に活性化されるTRPV1受容体電流（ITRPV1）を阻害薬で抑制した条件下に実験を行う必要がある．現在，IKheatのみを記録できる条件を検索している最中で，ATPの作用を検討する段階に至っていない．
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| 今後の研究の推進方策 |
研究計画が当初の予定よりも遅れているため，先ず，平成25年度に実施予定であった研究目的を遂行し，その上で平成26年度に実施予定の研究内容を行う．
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| 次年度の研究費の使用計画 |
本研究を遂行するためには，顕微鏡を使用することが不可欠である．現在使用中の顕微鏡は，ステージが勝手に動くなどの不具合があり，またかなり古いため，部品交換等の修理も困難である．そのため，当初，顕微鏡を購入することを計画していたが，平成25年度の助成金では購入額に届かず，次年度使用額が生じた。
次年度使用額と平成26年度の助成金と合算し，現有顕微鏡に代わる顕微鏡を新規購入することを計画している．
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