六君子湯の食欲亢進作用の細胞内メカニズムの解明

2013 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 25460922
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 武田 宏司 北海道大学, 薬学研究科(研究院), 教授 (60261294)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• キーワード: 六君子湯 / 食欲

研究概要

癌化学療法や悪液質にともなう食欲不振の病態解明は遅れており、有効な治療法も確立していない。これまで申請者らは、六君子湯およびその成分が、複数の機序によりグレリンシグナルを増強し、食欲不振を改善することを報告してきた。しかしながら、グレリンの細胞内エフェクターであるAMP依存性蛋白質リン酸化酵素（AMPK）およびNAD依存性脱アセチル化酵素1(SIRT1)に対する六君子湯の直接作用の有無は検討されていない。本研究はこの点を明らかにすることを目的とする。
平成25年度は、細胞内のSIRT1およびAMPK活性に及ぼす六君子湯の影響を解析した。グレリン受容体（GHSR1a）を発現している培養細胞（HUVEC、安的的にGHSR1aを発現させたHEK293細胞）に六君子湯溶液を添加したところ、SIRT1蛋白量の増加およびSIRT1活性の上昇が認められた。これらの効果はGHSR1aアンタゴニストである、SP-analogあるいはD-Lys :[D-Lys-3]-GHRP-6によって消失した。また、六君子湯はSIRT1の基質であるp53、PGC-1α、FOXO3aのアセチル化状態を減少させることが示された。さらに、六君子湯は、AMPKのリン酸化を促進し、AMPK活性を高めている事も明らかとなった。
以上より、少なくとも細胞レベルにおいては、六君子湯がSIRT1およびAMPK活性を増強することが確認された。

現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

アセチル化リジン抗体を用いた免疫沈降ーウェスタンブロットの結果が安定して得られないため。

今後の研究の推進方策

平成26年度は、雄性C57BL6マウスに六君子湯を経口投与した後、視床下部および末梢臓器（肝臓等）のSIRT1およびAMPKの定量あるいは活性測定を行う。この実験により、細胞レベル明らかとなった六君子湯の効果が、個体レベルにおいても観察されるかどうかを明らかにする予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Serotonin 2C receptor antagonism ameliorates novelty-induced hypophagia in aged mice. (2013)
  • 著者名/発表者名: Nahata M, Muto S, Nakagawa K, Ohnishi S, Sadakane C, Saegusa Y, Iizuka S, Hattori T, Asaka M, Takeda H.
  • 雑誌名: Psychoneuroendocrinology. 巻: 38 ページ: 2051-2064
  • DOI: 10.1016/j.psyneuen.2013.03.014.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Pathophysiological basis of anorexia. (2013)
  • 著者名/発表者名: Takeda H, Muto S, Nakagawa K, Ohnishi S, Sadakane C, Saegusa Y, Nahata M, Hattori T, Asaka M.
  • 雑誌名: Biol. Pharm. Bull. 巻: 36 ページ: 1401-1405
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cisplatin-induced anorexia and ghrelin. (2013)
  • 著者名/発表者名: Hattori T, Yakabi K, Takeda H.
  • 雑誌名: Vitam Horm. 巻: 92 ページ: 301-317
  • DOI: 10.1016/B978-0-12-410473-0.00012-X
  • 査読あり
• [学会発表] ctivation of Corticotropin-Releasing Factor 2 and Melanocortin-4 Receptors Mediates the Persistent Loss of Appetite Induced by Stress Loading in Advanced Age Mice.
  • 著者名/発表者名: Takeda H, Muto S, Ohnishi S, Nakagawa K, Sadakane C, Saegusa Y, Nahata M, Yamada C, Hattori T, Asaka M. A
  • 学会等名: Digestive Disease Week 2013
  • 発表場所: オーランド（米国フロリダ州）
• [学会発表] Serotonin 2C Receptor Antagonism Improves Stress-Induced Anorexia in Aged Mice.
  • 著者名/発表者名: 2) Muto S, Ohnishi S, Nakagawa K, Sadakane C, Saegusa Y, Nahata M, Yamada C, Hattori T, Asaka M, Takeda H.
  • 学会等名: Digestive Disease Week 2013
  • 発表場所: オーランド（米国フロリダ州）
• [学会発表] Involvement of Ghrelin Signaling Dysfunction in Acute Restraint Stress-Induced Delayed Gastric Emptying.
  • 著者名/発表者名: 3) Ohnishi S, Muto S, Nakagawa K, Sadakane C, Saegusa Y, Nahata M, Yamada C, Hattori T, Asaka M, Sakamoto, N Takeda H.
  • 学会等名: Digestive Disease Week 2013
  • 発表場所: オーランド（米国フロリダ州）
• [学会発表] 急性拘束ストレスによる胃排出遅延にはグレリンシグナル伝達障害が関与する
  • 著者名/発表者名: 武田宏司
  • 学会等名: 第55回日本平滑筋学会総会
  • 発表場所: 旭川市大雪クリスタルホール（北海道旭川市）
  • 招待講演
• [学会発表] ストレスによる老齢動物の摂食低下には5-HT2C受容体の機能亢進が関与する
  • 著者名/発表者名: 大西俊介、武藤修一、武田宏司
  • 学会等名: JDDW2013 （シンポジウム）
  • 発表場所: グランドプリンスホテル新高輪他（東京都）