好酸球性食道炎の病態に及ぼす胃酸の影響についての研究

2014 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 25460928
• 研究機関: 島根大学
• 研究代表者: 木下 芳一 島根大学, 医学部, 教授 (30243306)
• 研究分担者: 大嶋 直樹 島根大学, 医学部, 助教 (10403461)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• キーワード: 好酸球 / 胃酸 / プロトンポンプ阻害薬 / リンパ球 / 食道

研究実績の概要

本研究はマウスに逆流性食道炎と好酸球性食道炎のモデルを組み合わせて作成することによって胃酸の食道内逆流が好酸球性食道炎の発生に関わる機序を明らかにし、好酸球性食道炎の胃酸分泌抑制薬を用いた治療の確立を目指した研究である。
既に2013年度に好酸球性食道炎モデルマウスの作成は樹立できたため、本年度は慢性逆流性食道炎モデルマウスの作成を中心に行った。我々が以前樹立したラットにおける作成方法を採用し、野生型BALB/cマウスの前胃の結紮とネラトンカテーテルによる十二指腸の狭窄形成を行うも生存率に差が見られたため、狭窄形成に変えて十二指腸の部分結紮を行い改良を加えた。結果として肉眼的に明らかな食道下部のびらん形成は認めなかったが、組織学的に微小な粘膜欠損と、インジゴカルミン注入により胃内容の食道への逆流を認めた。これらにより両モデルの完成と判断し、今後は引き続きプロトコールの改良を行っていく予定である。
また、In vitroの研究ではヒト食道扁平上皮細胞株Het-1Aを用いて、様々な酸性環境下での刺激を行い、結果として種々の胆汁酸刺激によってTh1系サイトカインのみならずIL-5やIL-13などのTh2系サイトカインの上昇を認めた。この結果は食道内への酸逆流によってTh2系サイトカインが誘導され、好酸球性食道炎の発症に関与する可能性を示唆している。次年度はヒト末梢血から好酸球を間接磁気標識システムにより高純度に分離し、酸性条件下での各種サイトカイン、アレルギー関連遺伝子の発現、または食道上皮細胞株と共培養し、各種条件下での好酸球の活性化を測定する予定である。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

本研究では小動物であるマウスを用いて好酸球性食道炎モデルと慢性逆流性食道炎モデルを作成し、さらにこれらの両モデルを併せ持つマウスモデルを作成している。また本モデルをIn Vitro でさらに詳しく病態を検討するための培養細胞を用いたモデルも確立できた。特にIn VitroのモデルではTh2タイプのサイトカインの産生もIn Vivoのモデル同様に確認できており、研究の進行はおおむね予定どおりであると考えている。来年度は予定通り好酸球性食道炎モデルマウスの成立に及ぼす胃酸分泌抑制効果の検討を行っていく。具体的には各種プロトンポンプ阻害剤（オメプラゾール、ランソプラゾール、ラベプラゾール）およびヒスタミン受容体拮抗剤（ファモチジン、ラフチジン）が食道扁平上皮細胞にどのような効果を有するかについて検討する。これらはIn vitro、In vivoの両方の系において行う予定であり、平成26年度までに確立したモデルを使用していく。以上の理由から今後の進展も順調に進むことが予想される。

今後の研究の推進方策

平成27年度はIn Vivoの動物モデルとIn Vitroの培養細胞の系を両方使用しながら胃酸と胃酸分泌を抑制するために使用されるが免疫系への関与の可能性も考えられる多種の薬剤の効果を検証し、最終的には最近増加傾向の著しい好酸球性食道炎患者の胃酸分泌抑制薬の作用メカニズムを明らかとする。この検討によって食道粘膜の好酸球性炎症に及ぼす胃食道酸逆流の直接的な関与を明らかにすることができる。本研究により好酸球性食道炎の診療の向上を図れると思われる。さらに好酸球性食道炎の胃酸分泌抑制薬を用いた治療の確立を目指す。平成26年度より好酸球性食道炎を含めた好酸球性消化管障害は指定難病となり、今後の症例増加が予想され、本研究がその治療に寄与することを期待している。

研究成果

• [雑誌論文] Clinical features of eosinophilic esophagitis: Differences between Asian and Western populations (2015)
  • 著者名/発表者名: Ishimura N, Shimura S, Jiao DJ, Mikami H, Okimoto E, Uno G, Aimi M, Oshima N, Ishihara S, Kinoshita Y
  • 雑誌名: J. Gastroenterol Hepatol. 巻: 30 ページ: 71-77
  • DOI: 10.1111/jgh.12746
  • 査読あり
• [雑誌論文] 好酸球性食道炎を惹起する誘因を特定できるか？ (2015)
  • 著者名/発表者名: 木下芳一，石村典久，石原俊治
  • 雑誌名: 分子消化器病 巻: 12 ページ: 13-18
• [雑誌論文] クローン病に合併した好酸球性食道炎の1例 (2015)
  • 著者名/発表者名: 宮岡 洋一、塚野 航介、上野さや香、山之内智志、楠 龍策、伊藤 聡子、藤代 浩史、高下 成明、大沼 秀行、木下芳一
  • 雑誌名: Gastroenterological Endoscopy 巻: 57 ページ: 128/-133
  • 査読あり
• [雑誌論文] Relationship between esophageal cardiac glonols and gastro-esophageal reflux disease (2015)
  • 著者名/発表者名: Hanada K, Adachi K, Mishiro T, Tanaka S, Takahashi Y, Yoshikawa K, Kinoshita Y
  • 雑誌名: Internal Medicine 巻: 54 ページ: 91-96
  • DOI: doi: 10.2169/internalmedicine.54.3179
  • 査読あり
• [雑誌論文] 好酸球性食道炎・胃腸炎の診断と治療 (2014)
  • 著者名/発表者名: 木下 芳一
  • 雑誌名: 日本気管食道科学会専門医通信 巻: 48 ページ: 6-10
• [雑誌論文] 好酸球性食道炎 (2014)
  • 著者名/発表者名: 木下 芳一
  • 雑誌名: 日本医事新報 巻: 4707 ページ: 52
• [雑誌論文] 食物アレルギー研究と診療の最前線 (2014)
  • 著者名/発表者名: 海老澤元宏、木下 芳一
  • 雑誌名: Frontiers in Gastroenterology 巻: 19 ページ: 3-13
• [雑誌論文] Apoptotic cells ameliorate chronic intestinal inflammation by enhancing regulatory B cell function (2014)
  • 著者名/発表者名: Ansary Md. Mu, Ishihara S, Oka A, Kusunoki R, Oshima N, Yuki T, Kawashima K, Maegawa H, Kashiwagi N, Kinoshita Y
  • 雑誌名: Inflamm Bowel Dis 巻: 20 ページ: 2308-2320
  • DOI: doi: 10.1097/MIB.0000000000000240.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Reliability of symptoms and endoscopic findings for diagnosis of esophageal eosinophilia in a Japanese population (2014)
  • 著者名/発表者名: Shimura S, Ishimura N, Tanimura T, Yuki T, Miyake T, Kushiyama Y, Sato S, Fujishiro H, Ishihara S, Komatsu T, Kaneto E, Izumi A, Ishikawa N, Maruyama R, Kinoshita Y
  • 雑誌名: Digestion 巻: 90 ページ: 49-57
  • DOI: doi: 10.1159/000365209
  • 査読あり
• [雑誌論文] TGF-β detection and measurement in murine B cells: pros and cons of the different techniques. (2014)
  • 著者名/発表者名: Mishima Y, Ishihara S, Hansen JJ, Kinoshita Y
  • 雑誌名: Methods Mol Biol 巻: 1190 ページ: 71-80
  • DOI: doi: 10.1007/978-1-4939-1161-5_6.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Pathophysiology of Barrett's esophagus-associated neoplasia: circumferential spatial predilection (2014)
  • 著者名/発表者名: shimura N, Okada M, Mikami H, Okimoto E, Fukuda N, Uno G, Aimi M, Oshima N, Ishihara S, Kinoshita Y
  • 雑誌名: Digestion 巻: 89 ページ: 291-298
  • DOI: doi: 10.1159/000365123
  • 査読あり
• [雑誌論文] Intra-gastric pH following single oral administrations of rabeprazole and esomeprazole: double-blind cross-over comparison (2014)
  • 著者名/発表者名: Furuta K, Kohata Y, Fujiwara Y, Sugimoto M, Uotani T, Yamade M, Sahara S, Ichikawa H, Furuta T, Nio K, Iwakiri R, Inamori M, Kawamura O, Kusano M, Kato M, Kawami N, Iwakiri K, Takeuchi T, Higuchi H, Aimi M, Naora K, Fujimoto K, Arakawa T, Kinoshita Y
  • 雑誌名: J Clin Biochem Nutr 巻: 55 ページ: 178-183
  • DOI: doi: 10.3164/jcbn.14-41
  • 査読あり
• [雑誌論文] Role of Regulatory B Cells in Chronic Intestinal Inflammation: Association with Pathogenesis of Crohn's Disease (2014)
  • 著者名/発表者名: Oka A, Ishihara S, Mishima Y, Tada Y, Kusunoki R, Fukuba N, Yuki T, Kawashima K, Matsumoto S, Kinoshita Y
  • 雑誌名: Inflamm Bowel Dis. 巻: 20 ページ: 315-328
  • DOI: doi: 10.1097/01.MIB.0000437983.14544.d5.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Gastro-asophageal acid reflux mainly occurs on right side of asophagus (2014)
  • 著者名/発表者名: Ishimura N, Ishihara S, Kinoshita Y
  • 雑誌名: Gastrointest Endoscopy 巻: 79 ページ: 180-181
  • DOI: doi: 10.1016/j.gie.2013.08.004
  • 査読あり
• [図書] 序文：好酸球性消化管疾患診療ガイド（木下 芳一編）： (2014)
  • 著者名/発表者名: 木下 芳一
  • 総ページ数: 103
  • 出版者: 南江堂
• [図書] 好酸球性食道炎・胃腸炎の診断と治療：第24回気管食道科専門医大会テキスト（友田 幸一編） (2014)
  • 著者名/発表者名: 木下 芳一
  • 総ページ数: 58
  • 出版者: 日本気管食道科学会